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在轉(zhuǎn)錄組學(xué)領(lǐng)域,空間轉(zhuǎn)錄組也開(kāi)辟了新世界。Nature Methods在今年1月份將空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)評(píng)價(jià)為2020年度方法,空間轉(zhuǎn)錄組方法近幾年越來(lái)越受到歡迎,它將帶領(lǐng)組學(xué)在生物學(xué)的研究上進(jìn)入新的階段。從轉(zhuǎn)錄組測(cè)序到實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄測(cè)序,這一過(guò)程為精確認(rèn)識(shí)不同細(xì)胞類型提供了巨大的幫助。現(xiàn)在,新的空間轉(zhuǎn)錄組方法不僅帶來(lái)轉(zhuǎn)錄組信息,同時(shí)還提供空間信息,幫研究者更好辨別轉(zhuǎn)錄的位置,進(jìn)一步擴(kuò)展到單細(xì)胞分辨率,這會(huì)更大程度提升科學(xué)家對(duì)單個(gè)細(xì)胞的認(rèn)識(shí)和解讀。空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)遍地開(kāi)花,烈冰服務(wù)讓您的生物醫(yī)學(xué)研究如虎添翼。廈門高通量測(cè)序空間轉(zhuǎn)錄組平臺(tái)
空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的關(guān)鍵就在于,解決了空間位置保留的問(wèn)題。被放置在芯片區(qū)域內(nèi)的冰凍組織切片在經(jīng)過(guò)H&E染色和成像記錄后,會(huì)被進(jìn)行透化處理,釋放細(xì)胞中的RNA。芯片上的捕獲引物的中段設(shè)置了帶有獨(dú)特標(biāo)識(shí)的條形碼區(qū)域。芯片被劃分為了數(shù)個(gè)不同的捕獲區(qū)域,每個(gè)捕獲區(qū)域中錨定的引物都帶有不同的條形碼序列。每個(gè)區(qū)域?qū)?yīng)的組織位置會(huì)被記錄下來(lái),然后再進(jìn)行測(cè)序后,通過(guò)條形碼將不同區(qū)域的測(cè)序結(jié)果,映射到對(duì)應(yīng)的組織位置上,拼貼形成組織樣品的空間轉(zhuǎn)錄組圖像。深圳上海烈冰生物空間轉(zhuǎn)錄組多組學(xué)測(cè)序烈冰生物為您提供一站式全流程空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序服務(wù)。
空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與單細(xì)胞測(cè)序的結(jié)果不同,這里存在一個(gè)概念叫做NumberofSpotsundertissue,即,空間轉(zhuǎn)錄組片子上組織覆蓋的有效的spot位點(diǎn)。這個(gè)有效Spot的篩選標(biāo)準(zhǔn)是有UMI以及有序列表達(dá)。那么這個(gè)時(shí)候,貼片的質(zhì)量就成為了制約空間轉(zhuǎn)錄組有效區(qū)域的要點(diǎn)了。如果組織沒(méi)有很好地覆蓋到空轉(zhuǎn)片上,那么容易出現(xiàn)雖然有HE染色有組織片子,但是沒(méi)有基因表達(dá),即無(wú)有效Spot位點(diǎn)。同樣的,另一個(gè)就是組織切片的大小,也就是說(shuō)組織切片在整個(gè)玻片的覆蓋面積越小,分析的有效區(qū)域就越少。這兩者基本上決定了整個(gè)空間轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果的基礎(chǔ)質(zhì)量。
多樣本數(shù)據(jù)合并:FractionofReadsKept:合并樣本時(shí),各樣本根據(jù)MappedBarcodedReadsperCell數(shù)量計(jì)算出來(lái)的數(shù)據(jù)利用率。如果各樣本間該參數(shù)值相差很大,需要進(jìn)行Downsample處理,以數(shù)據(jù)量少的樣本為基準(zhǔn)將不同樣本中細(xì)胞測(cè)序深度標(biāo)化到同一水平,從而避免因測(cè)序深度差異導(dǎo)致的基因檢測(cè)數(shù)量、基因表達(dá)水平的差異。烈冰科技自主研發(fā)的單細(xì)胞云平臺(tái)致力于幫助每一位客戶定制化分析數(shù)據(jù),深入解讀數(shù)據(jù)分析結(jié)果,深入挖掘其背后的生物學(xué)意義;從操作便捷、結(jié)果可視化、分析可追溯、系統(tǒng)穩(wěn)定等方面助力單細(xì)胞研究,加速科研進(jìn)程!烈冰開(kāi)展了空間轉(zhuǎn)錄組、單細(xì)胞多組學(xué)以及空間轉(zhuǎn)錄組等多種產(chǎn)品在內(nèi)的全套科研解決方案。
烈冰生信團(tuán)隊(duì)傾情研發(fā)的NovelBrain®生信大數(shù)據(jù)分析平臺(tái),可實(shí)現(xiàn)零代碼操作、簡(jiǎn)單方便:?jiǎn)渭?xì)胞瀏覽器的操作簡(jiǎn)單,不需要命令行操作。簡(jiǎn)單拖拽、設(shè)置參數(shù)即可運(yùn)行,即使生信0基礎(chǔ)用戶也可以運(yùn)用自如;可視化展示海量結(jié)果文件:可視化展示Cluster的基因數(shù),UMI數(shù)量、線粒體RNA占比信息;以及不同Cluster對(duì)應(yīng)的細(xì)胞數(shù)量、基因表達(dá)量、RNA表達(dá)量、樣本細(xì)胞分布、線粒體RNA表達(dá)量等;3D立體展示,文章動(dòng)圖先人一步:?jiǎn)渭?xì)胞瀏覽器針對(duì)t-SNE圖、UMAP圖和pseudotime結(jié)果進(jìn)行三維立體展示,更加直觀立體的觀察細(xì)胞分布和聚類情況。附加流式分選細(xì)胞表面Marker,對(duì)于較低分辨率的標(biāo)志物也能有效鑒定,助力高要求測(cè)序項(xiàng)目。合肥烈冰空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
測(cè)序可準(zhǔn)確地分析基因表達(dá)差異、基因結(jié)構(gòu)變異、篩選分子標(biāo)記(SNPs或SSR)等生命科學(xué)重要問(wèn)題。廈門高通量測(cè)序空間轉(zhuǎn)錄組平臺(tái)
空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)(Spatial Transcriptomics)是指在組織切片上完成,保留樣本空間信息的組學(xué)研究??臻g轉(zhuǎn)錄組可展示組織切片中不同區(qū)域的基因表達(dá)情況,揭示精細(xì)病理區(qū)域中激發(fā)的信號(hào)通路,完成分子特征驅(qū)動(dòng)病理特征的機(jī)制解析??臻g轉(zhuǎn)錄組學(xué)完成了病理數(shù)字化結(jié)合病理影像化的技術(shù)革新,對(duì)于診斷標(biāo)志物、耐藥位點(diǎn)以及靶向藥物的研發(fā),免疫治等新興領(lǐng)域都具有重要作用。當(dāng)組織冷凍切片附在帶有spatialbarcode的空間轉(zhuǎn)錄組芯片上時(shí),通過(guò)透化處理,細(xì)胞內(nèi)的mRNA釋放出來(lái),從而被芯片上帶有oligo-dT的探針捕獲。被捕獲的mRNA開(kāi)始逆轉(zhuǎn)錄,得到的cDNA中包含了spatialbarcode序列。通過(guò)上機(jī)測(cè)序,可以將每個(gè)mRNA轉(zhuǎn)錄的序列映射回組織切片中的映射回組織切片中的原始位置。廈門高通量測(cè)序空間轉(zhuǎn)錄組平臺(tái)
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