膜片鉗是一種用于研究生物膜電生理特性的技術(shù),它能夠測(cè)量細(xì)胞膜通道和受體的電生理活動(dòng),以及藥物對(duì)它們的影響。膜片鉗技術(shù)的基本原理是將細(xì)胞膜的電生理活動(dòng)轉(zhuǎn)化為微弱電流信號(hào),然后通過(guò)放大器和記錄設(shè)備進(jìn)行測(cè)量和記錄。在膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞膜被固定在鉗制電極上,同時(shí)另一個(gè)電極用于刺激或記錄電信號(hào)。通過(guò)這種方式,可以測(cè)量細(xì)胞膜上各種通道和受體的電生理活動(dòng),例如鈉離子通道、鉀離子通道、氯離子通道、鈣離子通道等。膜片鉗技術(shù)具有高靈敏度和高分辨率的特點(diǎn),可以檢測(cè)到非常微小的電流變化。此外,它還可以在單細(xì)胞水平上研究電生理活動(dòng),提供有關(guān)通道和受體功能和調(diào)節(jié)的詳細(xì)信息。因此,膜片鉗技術(shù)被廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)、心血管藥理學(xué)、藥物篩選等領(lǐng)域。總之,膜片鉗技術(shù)是一種強(qiáng)大的工具,用于研究生物膜電生理特性和藥物對(duì)它們的影響。通過(guò)使用膜片鉗技術(shù),科學(xué)家可以更深入地了解細(xì)胞膜上通道和受體的功能和調(diào)節(jié)機(jī)制,為新藥研發(fā)和疾病zhi療提供重要的信息。膜片鉗技術(shù),讓離子通道研究變得更加準(zhǔn)確與高效!美國(guó)高通量全自動(dòng)膜片鉗哪家好
電壓鉗技術(shù),是20世紀(jì)初由Cole發(fā)明,Hodgkin和Huxley完善,其設(shè)計(jì)的主要目的是為了證明動(dòng)作電位的產(chǎn)生機(jī)制,即動(dòng)作電位的峰電位是由于膜對(duì)鈉的通透性發(fā)生了一過(guò)性的增大過(guò)程。但當(dāng)時(shí)沒(méi)有直接測(cè)定膜通透性的方法,于是就用膜對(duì)某種離子的電導(dǎo)來(lái)**該種離子的通透性,膜電導(dǎo)測(cè)定的依據(jù)是電學(xué)中的歐姆定律,如膜的Na電導(dǎo)GNa與電化學(xué)驅(qū)動(dòng)力(Em-ENa)和膜電流INa的關(guān)系GNa=INa/(Em-ENa).因此可通過(guò)測(cè)量膜電流,再利用歐姆定律來(lái)計(jì)算膜電導(dǎo),但是,利用膜電流來(lái)計(jì)算膜電導(dǎo)時(shí),記錄膜電流期間的膜電位必須保持不變,否則膜電流的變化就不能**膜電導(dǎo)的變化。這一條件是利用電壓鉗技術(shù)實(shí)現(xiàn)的。下張幻燈中的右邊兩張圖是Hodgkin和Huxley在半個(gè)世紀(jì)以前利用電壓鉗記錄的搶烏賊的動(dòng)作電位和動(dòng)作電位過(guò)程中的膜電流的變化圖,他們的實(shí)驗(yàn)***證明參與動(dòng)作電位的離子流由Na,k,漏(Cl)三種成分組成。并對(duì)這些離子流進(jìn)行了定量分析。這一技術(shù)對(duì)闡明動(dòng)作電位的本質(zhì)和離子通道的的研究做出了極大的貢獻(xiàn)。滔博生物TOP-Bright專(zhuān)注基于多種離子通道靶點(diǎn)的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,專(zhuān)業(yè)團(tuán)隊(duì),7*34小時(shí)隨時(shí)人工在線(xiàn)咨詢(xún).細(xì)胞膜片鉗單細(xì)胞離子通道探索之旅,從選擇膜片鉗開(kāi)始!
膜片鉗技術(shù)是一種細(xì)胞內(nèi)記錄技術(shù),是研究離子通道活動(dòng)的蕞佳工具,也是應(yīng)用蕞很廣的電生理技術(shù)之一。該技術(shù)通過(guò)施加負(fù)壓將微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)的前列與細(xì)胞膜緊密接觸,形成GΩ以上的阻抗,使電極開(kāi)口處的細(xì)胞膜與其周?chē)ぴ陔妼W(xué)上絕緣。被孤立的小膜片面積為μm量級(jí),內(nèi)中只有少數(shù)離子通道。玻璃微電極中含有一根浸入電解溶液中的導(dǎo)線(xiàn),用于傳導(dǎo)離子。在此基礎(chǔ)上對(duì)該膜片施行電壓鉗位(即保持跨膜電壓恒定),如果單個(gè)離子通道被包含在膜片內(nèi),則可對(duì)此膜片上的離子通道的電流進(jìn)行監(jiān)測(cè)記錄。通過(guò)觀(guān)測(cè)單個(gè)通道開(kāi)放和關(guān)閉的電流變化,可直接得到各種離子通道開(kāi)放的電流幅值分布、開(kāi)放幾率、開(kāi)放壽命分布等功能參量,并分析它們與膜電位、離子濃度等之間的關(guān)系。還可把吸管吸附的膜片從細(xì)胞膜上分離出來(lái),以膜的外側(cè)向外或膜的內(nèi)側(cè)向外等方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。這種技術(shù)對(duì)小細(xì)胞的電壓鉗位、改變膜內(nèi)外溶液成分以及施加藥物都很方便。
ePatch雖然設(shè)備非常小巧,但功能完備,傳統(tǒng)膜片鉗設(shè)備能做的實(shí)驗(yàn),用ePatch幾乎都能做。具有voltage-clamp,current-clamp,zerocurrent-clamp三種模式,自動(dòng)電極電壓飄移補(bǔ)償,C-fast-C-slow-R-series-P/N補(bǔ)償,Bridgebalance補(bǔ)償?shù)裙δ堋?梢宰鋈?xì)胞記錄也可以做單通道記錄,膜片鉗技術(shù)常做的離子通道電流,突觸后電流,動(dòng)作電位檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)都能輕松實(shí)現(xiàn)。公司還為此開(kāi)發(fā)了友好的控制和記錄軟件,筆者上手接觸了一下,發(fā)現(xiàn)跟AXON的軟件類(lèi)似,并且程序編輯更為簡(jiǎn)單易用。所記錄到的數(shù)據(jù)可以直接使用Clampfit進(jìn)行分析,可以說(shuō)對(duì)于使用過(guò)AXON設(shè)備的膜片鉗工作者來(lái)說(shuō),上手毫無(wú)難度。滔博生物TOP-Bright專(zhuān)注基于多種離子通道靶點(diǎn)的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,專(zhuān)業(yè)團(tuán)隊(duì),7*61小時(shí)隨時(shí)人工在線(xiàn)咨詢(xún).膜片鉗是一種用于夾持薄膜或其他薄片材料的工具。
膜片鉗的應(yīng)用范圍:1.單離子通道(如鈉、鉀)的功能研究;2.心肌細(xì)胞離子通道研究(尤其與藥物作用相關(guān)的);3.常規(guī)與病理的離子通道作用機(jī)制研究;4.單細(xì)胞的形態(tài)與功能關(guān)系的研究;5.心血管藥理學(xué)的研究;6.腦片膜片鉗(證實(shí)了腦組織在體外也能存活并保持很好的活性狀態(tài),能使對(duì)腦細(xì)胞的研究更接近生理狀態(tài)下的情況,可檢驗(yàn)不同腦區(qū)間的神經(jīng)通路與功能鏈接);7.神經(jīng)環(huán)路的研究(光遺傳或化學(xué)遺傳病毒載體表達(dá)的驗(yàn)證);8.神經(jīng)突觸可塑性的研究。微電極的制備膜片鉗電極是用外徑為1-2mm的毛細(xì)玻璃管拉制成的。美國(guó)單電極膜片鉗產(chǎn)品介紹
Neher將膜片鉗技術(shù)與Fura 2 熒光測(cè)鈣技術(shù)結(jié)合。美國(guó)高通量全自動(dòng)膜片鉗哪家好
膜片鉗技術(shù)(patchclamptechniques)是采用鉗制電壓或電流的方法對(duì)生物膜上離子通道的電活動(dòng)進(jìn)行記錄的微電極技術(shù)。1989年,Blanton將腦片電生理記錄與細(xì)胞的膜片鉗記錄結(jié)合起來(lái),建立了腦片膜片鉗記錄技術(shù)(patchclamponinvitrobrainslices),這為在細(xì)胞水平研究反射中樞系統(tǒng)離子通道或受體在神經(jīng)環(huán)路中的生理和藥理學(xué)作用及其機(jī)制提供了可能性。離體的腦組織能夠在一定的溫度、酸度和滲透壓、通氧狀態(tài)等條件下存活并保持良好的生理狀態(tài)。與急性分離的或培養(yǎng)的神經(jīng)元相比,離體腦片中的神經(jīng)元更接近生理狀態(tài):基本保持了在體情況下的細(xì)胞形態(tài),神經(jīng)細(xì)胞之間及神經(jīng)細(xì)胞與非神經(jīng)細(xì)胞之間的很多固有聯(lián)系,以及較為正常完整的突觸回路、受體分布、遞質(zhì)釋放及其信息傳遞等功能。美國(guó)高通量全自動(dòng)膜片鉗哪家好