為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清?胎兒血清含有較多的生長因子,丙種球蛋白(即抗體)含量較低,非胎兒血清也有。這些很重要,因為生長因子促進細(xì)胞存活和增殖,而抗體可以與培養(yǎng)的細(xì)胞結(jié)合。此外,與成人或新生兒相比,胎兒血清中的補體蛋白(補體)含量較低。這些補體具有溶解培養(yǎng)細(xì)胞和干擾免疫測定的不良作用。血清和血漿均來自全血,通過離心去除包括紅細(xì)胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過在離心前向血液中加入抗凝劑來制備的,但不會去除凝血蛋白。通過在離心前使血液凝固或通過普遍/漸進離心來制備血清。因此,與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。真正的胎牛血清,一般表現(xiàn)出微紅色或橘紅色。蘭溪哺乳動物細(xì)胞生長培養(yǎng)基
胎牛血清(FBS)用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長補充劑。動物血清(牛血清和非牛血清)都用于細(xì)胞培養(yǎng),其中使用更普遍的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,元素,酶和其他未定義的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對于支持細(xì)胞生長都是必需的。制造環(huán)境中的學(xué)術(shù)和工業(yè)研究人員以及科學(xué)家都在其細(xì)胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清(FBS)進行調(diào)查,包括生物技術(shù)研究/生產(chǎn),疫苗制造,克隆和動物診斷。樂清天狼星紅染色試劑盒胎牛血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、元素、無機物等。
如何解凍血清?血清應(yīng)該在2-8°C過夜解凍以避免降解,或者在室溫條件下,定期輕輕搖動使組分重懸。解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基前應(yīng)該混合均勻。由于反復(fù)凍存會嚴(yán)重影響血清品質(zhì),建議將解凍的血清分裝成單次使用量,并凍存于-20°C。如果儲存于2-8°C,應(yīng)該在2-4周使用。溫度超過37°C時會降解營養(yǎng)成分,破壞血清功能。如果血清收到時存在部分解凍,還能繼續(xù)使用嗎?血清是干冰包裝運輸,到達(dá)時應(yīng)該是冷凍狀態(tài)。但是,如果由于運輸時間超期導(dǎo)致部分解凍,依然可以繼續(xù)使用。完全解凍后分裝成單次用量進行凍存。血清產(chǎn)品的保質(zhì)期是多久?大部分血清產(chǎn)品,在未開封凍存的情況下生產(chǎn)之日起5年,具體可參考瓶身或CoA上的信息。
胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別?胎牛血清是實驗室里細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,因為胎牛從未接觸過外界,這使得其血清中所含的抗體和補體極少,幾乎沒有對細(xì)胞有害的成分。并且高質(zhì)量的胎牛血清含有的營養(yǎng)豐富,可滿足細(xì)胞生長的需求,在哺乳動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)中發(fā)揮著重要作用。那么為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢?想知道兩者之間都有哪些區(qū)別?不妨看看以下小編歸納的幾點內(nèi)容:胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別:來源不同,胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個月胎齡),之后對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成采集血液的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且它們的發(fā)育相對于胎牛而言更加完全。胎牛血清常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、元素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。功能:牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的元素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到消毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細(xì)胞不受傷害。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛。蘭溪哺乳動物細(xì)胞生長培養(yǎng)基
胎牛血清極低內(nèi)有害元素,達(dá)到特級標(biāo)準(zhǔn),使細(xì)胞更健康,實驗更順利。蘭溪哺乳動物細(xì)胞生長培養(yǎng)基
胎牛血清的保存方法:1、需要長期保存的胎牛血清須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。3、胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。蘭溪哺乳動物細(xì)胞生長培養(yǎng)基
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