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什么是優(yōu)良的胎牛血清?免疫球蛋白,國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè)。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出采集血液的時(shí)的牛齡情況,國(guó)產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。維生素含量,此外,維生素的使用也是要考慮在內(nèi)的。國(guó)內(nèi)外的血清,都不對(duì)維生素進(jìn)行測(cè)試(無四環(huán)素胎牛血清理外)。其中,由于國(guó)外維生素使用較為嚴(yán)格,用量有限,同時(shí)每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以追溯源頭,所以國(guó)外胎牛血清不含維生素或者含量極低。但是國(guó)內(nèi)由于維生素使用普遍,血清中殘留量很高,導(dǎo)致國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量很差,不利于細(xì)胞培養(yǎng)。進(jìn)口的胎牛血清:過濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的。諸暨培養(yǎng)基
細(xì)胞和組織培養(yǎng)為什么需要使用血清?血清通常作為補(bǔ)充劑,以2-10%的濃度加入培養(yǎng)基中,為細(xì)胞提供綜合營(yíng)養(yǎng)、元素、生長(zhǎng)和附著因子。血清還可作為細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的緩沖液,避免各種因素(包括pH變化、蛋白水解活性或重金屬、內(nèi)毒等)干擾細(xì)胞生長(zhǎng)或產(chǎn)生毒性作用。血清是如何加工的?血清采集后冷凍運(yùn)輸至加工工廠,解凍并檢測(cè)細(xì)菌、病毒、內(nèi)有害元素和血紅蛋白含量等多項(xiàng)指標(biāo)。選擇更優(yōu)良的血清在無菌環(huán)境下進(jìn)行系列膜過濾無菌處理,然后在無菌環(huán)境下進(jìn)行分裝并快速凍存于-20°C,在所有批次驗(yàn)證達(dá)到或找過QC標(biāo)準(zhǔn)之前隔離存放。徐州胎牛血清胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分。
胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別:組份與比例不同,雖然胎牛血清與新生牛血清的成分并不存在很大的差別,可是諸如促細(xì)胞生長(zhǎng)因子和促貼附因子等組份并不相同,而且兩者之間的元素以及其他活性物質(zhì)的比例也不同。胎牛血里的生長(zhǎng)因子適合牛體內(nèi)各種細(xì)胞生長(zhǎng),通常在8個(gè)月胎齡后慢慢消失。另外,胎牛血清的免疫球蛋白含量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于新生牛血清,胎牛的血清相對(duì)來說比較純,所以培養(yǎng)細(xì)胞的效果會(huì)更佳。用途與用法不同,由于胎牛血清與新生牛血清存在細(xì)微差異,因此它們的用途與用法也不盡相同。
血清是基礎(chǔ)培養(yǎng)基中極為重要的細(xì)胞生長(zhǎng)和粘附因子、元素、脂質(zhì)和礦物質(zhì)來源。此外,血清還可調(diào)節(jié)細(xì)胞膜通透性,并可作為向細(xì)胞內(nèi)運(yùn)送脂質(zhì)、酶、微量營(yíng)養(yǎng)素和微量元素的載體。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清(FetalBovineSerum)是通過無菌手術(shù)剖腹后取胎,穿刺心臟采集血液制成。胎牛血清中所含的對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞有害的成分(抗體等)非常少,故質(zhì)量更高。胎牛血清還未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分更少。
胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡(jiǎn)稱FBS):是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段,血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育完全這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。有下列情況者,對(duì)血清內(nèi)有害元素應(yīng)格外留意篩選:1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí),干細(xì)胞對(duì)內(nèi)有害元素非常敏感,如果血清中內(nèi)有害元素≥3EU/ml時(shí),干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》,以決定是否入圍進(jìn)行試用。2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí),過高的內(nèi)有害元素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí),選擇極低的內(nèi)有害元素(更好≤1EU/ml),對(duì)實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。胎牛血清:母牛懷孕3-8個(gè)月時(shí),采用剖腹心臟密閉穿刺取血。天狼星紅染色試劑盒廠家
胎牛血清,是胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物。諸暨培養(yǎng)基
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?來源不同:胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采集血液獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、元素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個(gè)月。解凍血清時(shí),應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,基本不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。諸暨培養(yǎng)基
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