實(shí)驗(yàn)室胎牛血清使用問題匯總:1、血清的保存方法。建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。假如存放于4℃,請(qǐng)勿超過個(gè)月。若血清瓶次無法用完,建議無菌分裝至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。2、在培養(yǎng)基中添加了血清和維生素后,是否可以長(zhǎng)期保存?因?yàn)樾┚S生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解,所以新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和維生素后,應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用完畢。3、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱融解,然后在室溫下全融。解凍血清時(shí),必須在融解過程中規(guī)則地?fù)u晃均勻,使溫度及成分均,減少沉淀的發(fā)生。推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。胎牛血清提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。DMEM/F12廠家直供
胎牛血清的作用:保護(hù)細(xì)胞,胎牛血清可以為生日包的生長(zhǎng)提供一些重要的元素,同時(shí)可以為身體提供蛋白質(zhì),能夠識(shí)別維生素和一些其他的物質(zhì),因此能夠比較好的來處理一些有害物質(zhì)。這個(gè)產(chǎn)品也可以提供蛋白酶的抑制劑,可以使細(xì)胞傳代時(shí),將剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能夠起到保護(hù)細(xì)胞不受到傷害的作用。胎牛血清是一個(gè)比較先進(jìn)的產(chǎn)品,也是一個(gè)比較先進(jìn)的研發(fā)成果,目前的生產(chǎn)成本是比較高的,所以在市面上的價(jià)格并不會(huì)太便宜,根據(jù)了解目前的銷售價(jià)格可能需要2000多元,所以大家看到幾百元的產(chǎn)品要慎重的購買,當(dāng)然可能也會(huì)與規(guī)格的大小有密切的關(guān)系。徐州胎牛血清胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo):一、內(nèi)有害元素,內(nèi)有害元素是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的特有成分。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時(shí),才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)有害元素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)有害元素含量越低,對(duì)細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和傳代;內(nèi)有害元素含量過高,會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國際上規(guī)定,胎牛血清的級(jí)別,應(yīng)以內(nèi)有害元素水平的高低來確定,其中,特級(jí)胎牛血清的內(nèi)有害元素應(yīng)。二、血紅蛋白含量,胎牛血清的顏色會(huì)根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無直接影響。這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采集血液過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
胎牛血清(FBS)用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。動(dòng)物血清(牛血清和非牛血清)都用于細(xì)胞培養(yǎng),其中使用更普遍的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長(zhǎng)因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,元素,酶和其他未定義的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對(duì)于支持細(xì)胞生長(zhǎng)都是必需的。制造環(huán)境中的學(xué)術(shù)和工業(yè)研究人員以及科學(xué)家都在其細(xì)胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清(FBS)進(jìn)行調(diào)查,包括生物技術(shù)研究/生產(chǎn),疫苗制造,克隆和動(dòng)物診斷。胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。
胎牛血清、新生牛血清、小牛血清區(qū)別三者之間的區(qū)別:1、采集血液時(shí)間不同,胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛懷孕5-8個(gè)月時(shí),通過胎牛心臟穿刺采集血液獲取的血清。新生牛血清(NewbornCalfSerum)是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清(CalfSerum)采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同,兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、元素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發(fā)育所必需的生長(zhǎng)因子。一些生長(zhǎng)因子到胎牛10個(gè)月時(shí)就消失了。用途與用法不同,某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可。使用濃度一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物。溧陽哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基
胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。DMEM/F12廠家直供
什么是優(yōu)良的胎牛血清?外觀,好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象??偟鞍缀?,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明采集血液的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。血紅蛋白,標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。pH,國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來初步鑒別血清的來源。DMEM/F12廠家直供
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