重組蛋白是由操縱的基因——重組基因編碼的蛋白質(zhì)，由特定的重組表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)生(見蛋白表達(dá)系統(tǒng))。重組基因是一種新的基因組合，由一個(gè)或多個(gè)DNA的片段或基因從不同的分子或其他物種插入。與天然蛋白相比，重組蛋白產(chǎn)量大，生產(chǎn)相對容易。重組蛋白在研究細(xì)胞因子和生長因子、酶和激酶研究以及補(bǔ)體系統(tǒng)功能等生物學(xué)過程中發(fā)揮著重要作用。此外，重組蛋白被認(rèn)為是一種高效的藥物，不會(huì)產(chǎn)生脫靶的副作用，比小分子的開發(fā)時(shí)間更短(見重組蛋白藥物)。PeproTech提供多種高質(zhì)量細(xì)胞因子和重組蛋白，包裝規(guī)格多，備受科學(xué)家青睞。人TNF-alpha重組蛋白

重組蛋白的生化和生物學(xué)特性對于選擇表達(dá)策略來說是必須要考慮的，可以通過它們對表達(dá)結(jié)果和產(chǎn)物的可溶性做出初步預(yù)測。通過分析一級序列可以整合一組屬性用以預(yù)測二級結(jié)構(gòu)、生物學(xué)定位 (細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、周質(zhì)腔或胞外）、家族歸類 (折疊和結(jié)構(gòu)域) 及推斷生化性質(zhì) (等電點(diǎn)、無序區(qū)域、配基)。目標(biāo)蛋白質(zhì)的一些特征，如極可能存在的跨膜螺旋，可能要求必須使用為表達(dá)膜蛋白設(shè)計(jì)的系統(tǒng)，或需要使用克隆單個(gè)結(jié)構(gòu)域的策略以表達(dá)蛋白質(zhì)的可溶部分。使用目標(biāo)蛋白質(zhì)的特征來指導(dǎo)表達(dá)宿主的選擇和載體的構(gòu)建有助于獲得成熟的、定位適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)?？梢允褂媚繕?biāo)蛋白質(zhì)或同源蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和歷史數(shù)據(jù)對序列信息加以補(bǔ)充，從而有助于表達(dá)系統(tǒng)的進(jìn)一步優(yōu)化。例如，已知某蛋白質(zhì)需要某種輔基以保持正確的功目旨，那就必須選擇特定的宿主以確保獲得具有完整功能的表達(dá)產(chǎn)物。人重組蛋白廠家重組蛋白定制中的注意事項(xiàng)。

蛋白的溶解性與很多因素有關(guān)，其中比較重要的是pH值和離子強(qiáng)度。購買的重組蛋白按照說明上所標(biāo)明的溶解液來溶解。如果您所用的溶解液的pH值和離子強(qiáng)度與說明書中所標(biāo)明的不符，很多時(shí)候會(huì)造成細(xì)胞因子或重組蛋白不能完全溶解或者根本無法溶解，這樣所配得的細(xì)胞因子或重組蛋白必然活性不夠或喪失。重組蛋白溶解時(shí)一定要溶解到指定的濃度，高于或低于該濃度范圍，都可能會(huì)導(dǎo)致重組蛋白不穩(wěn)定，出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。另外，重組蛋白在溶解時(shí)，一定不能用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩，以免出現(xiàn)蛋白鏈斷裂。重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的，一般用移液器的吸頭輕輕吹幾下，即可使細(xì)胞因子或重組蛋白完全溶解。

如果說明書上沒有具體的說明，如何重溶（Reconstitute）凍干的重組蛋白？我們建議采用以下方式：（1）將試劑瓶和重溶緩沖液平衡至室溫。（2）短暫離心試劑瓶以確保在小瓶底部收集所有凍干物。（3）加入推薦的重溶緩沖液，達(dá)到產(chǎn)品說明上推薦的濃度。避免劇烈振蕩或移液器吹打，這可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。（4）使試劑瓶在室溫下重溶15-30分鐘，可使用360度搖床或手動(dòng)輕輕上下顛倒。（5）每管體積不小于10μL分裝，并按產(chǎn)品說明書上的指示儲(chǔ)存。（6）如果小瓶內(nèi)呈現(xiàn)薄片或顆粒，則在室溫下將產(chǎn)品混合幾小時(shí)，然后在4℃過夜。重組蛋白的活性高低，是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。

在科研實(shí)驗(yàn)中，重組蛋白的生物學(xué)活性通常以ED50來表示。在大多數(shù)情況下，研究人員一般基于各類指示性細(xì)胞——如某些原代細(xì)胞或細(xì)胞系——來開展生物分析。常用的生物分析法包括細(xì)胞增殖分析，細(xì)胞趨化性分析，細(xì)胞因子生成分析和細(xì)胞毒性分析。通常以ED50來表示某一細(xì)胞因子的生物活性，該值表示能夠誘發(fā)50%大效應(yīng)的細(xì)胞因子濃度。這一表示效價(jià)的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線為S形的細(xì)胞因子。ED50被定義為處于max反應(yīng)50%水平的細(xì)胞因子濃度。這一表示現(xiàn)效價(jià)的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線為S形的細(xì)胞因子。將ng/mL單位的ED50活性值（注意：如當(dāng)前為pg/mL，請先換算為ng/mL）轉(zhuǎn)換為（注意：如需當(dāng)前單位為pg/mL，請先換算為ng/mL）單位/毫克（unit/mg）特定活性值的公式為（當(dāng)ED50表示為處于一個(gè)范圍區(qū)間時(shí)，選擇此范圍的中點(diǎn)值）：1 x 10E6/ED50* (ng/mL) = 以單位/毫克（Units/mg蛋白）表示為單位的特定蛋白特定活性。多肽類激素藥是重組蛋白藥物中的明星產(chǎn)品。人TNF-alpha重組蛋白

重組蛋白疫苗有著天然的優(yōu)勢。人TNF-alpha重組蛋白

哺乳動(dòng)物蛋白表達(dá)系統(tǒng)在生產(chǎn)重組蛋白中的應(yīng)用中，優(yōu)勢明顯。具體表現(xiàn)為以下方面，能實(shí)現(xiàn)翻譯后修飾及正確的蛋白折疊復(fù)性：哺乳動(dòng)物為真核細(xì)胞，細(xì)胞器可以對蛋白正確折疊加工。表達(dá)水平高:載體可在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高表達(dá)重組蛋白，表達(dá)量可高達(dá)1-3g/L。蛋白表達(dá)高效穩(wěn)定：高效啟動(dòng)子控制，穩(wěn)定表達(dá)，并可以選擇多種表達(dá)，如瞬時(shí)表達(dá)、穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)、營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞株表達(dá)(DHFR/GS)、大規(guī)模懸浮細(xì)胞表達(dá)等。適合大規(guī)模蛋白表達(dá):常用的哺乳動(dòng)物表達(dá)宿主細(xì)胞（HEK293和CHO），使用懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，可以在一個(gè)月內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)克級蛋白。人TNF-alpha重組蛋白

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