重組人胰島素是上市的重組蛋白藥物,用于1型和2型糖尿病,經(jīng)過(guò)30多年的發(fā)展,目前胰島素已從一代動(dòng)物源性胰島素發(fā)展到第四代長(zhǎng)效胰島素類似物。目前重組蛋白藥物主要包含:1. 多肽類------重組人胰島素、胰島素類似物、重組人生長(zhǎng)因子和重組人促卵泡成熟因子等。2. 細(xì)胞因子-----重組人促卵泡成熟因子、重組人干擾素α、β、γ、重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子、重組人白細(xì)胞介素2、11、重組人表皮生長(zhǎng)因子、重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因等。3. 重組酶----重組人尿激酶原、重組人α葡萄糖苷酶制劑等,以及其它如重組人骨形成蛋白2和重組水蛭素等多個(gè)細(xì)分領(lǐng)域。怎么才能讓重組蛋白保持良好的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性呢?大鼠BMP-4重組蛋白定制
單克隆抗體是一類重組蛋白,不論是科研還是醫(yī)療中,都有很大應(yīng)用。突出的表達(dá)重組單克隆抗體的宿主細(xì)胞系是CHO、NS0、SP2/0、HEK293和PER.C6。然而,大多數(shù)文獻(xiàn)都是關(guān)于CHO細(xì)胞的,該細(xì)胞仍然是現(xiàn)今工業(yè)生產(chǎn)重組蛋白藥物的主力,占到了70%(Jayapal等人,2007)。CHO細(xì)胞是于1986年一個(gè)被批準(zhǔn)的重組生物制藥的表達(dá)系統(tǒng)(組織型纖溶酶原actin物;t-PA)。從那時(shí)起,CHO細(xì)胞就是是重組蛋白表達(dá)的選擇。盡管有其他哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)可用,CHO細(xì)胞仍然是優(yōu)化重組蛋白表達(dá)研究的中心。進(jìn)口IL-7重組蛋白定制提供國(guó)內(nèi)外知名品牌的重組蛋白,種類齊全,價(jià)格優(yōu)惠。
重組蛋白是由操縱的基因——重組基因編碼的蛋白質(zhì),由特定的重組表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)生(見(jiàn)蛋白表達(dá)系統(tǒng))。重組基因是一種新的基因組合,由一個(gè)或多個(gè)DNA的片段或基因從不同的分子或其他物種插入。與天然蛋白相比,重組蛋白產(chǎn)量大,生產(chǎn)相對(duì)容易。重組蛋白在研究細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子、酶和激酶研究以及補(bǔ)體系統(tǒng)功能等生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。此外,重組蛋白被認(rèn)為是一種高效的藥物,不會(huì)產(chǎn)生脫靶的副作用,比小分子的開(kāi)發(fā)時(shí)間更短(見(jiàn)重組蛋白藥物)。
在科研實(shí)驗(yàn)中,重組蛋白的生物學(xué)活性通常以ED50來(lái)表示。在大多數(shù)情況下,研究人員一般基于各類指示性細(xì)胞——如某些原代細(xì)胞或細(xì)胞系——來(lái)開(kāi)展生物分析。常用的生物分析法包括細(xì)胞增殖分析,細(xì)胞趨化性分析,細(xì)胞因子生成分析和細(xì)胞毒性分析。通常以ED50來(lái)表示某一細(xì)胞因子的生物活性,該值表示能夠誘發(fā)50%大效應(yīng)的細(xì)胞因子濃度。這一表示效價(jià)的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線為S形的細(xì)胞因子。ED50被定義為處于max反應(yīng)50%水平的細(xì)胞因子濃度。這一表示現(xiàn)效價(jià)的方法適用于那些劑量效應(yīng)曲線為S形的細(xì)胞因子。將ng/mL單位的ED50活性值(注意:如當(dāng)前為pg/mL,請(qǐng)先換算為ng/mL)轉(zhuǎn)換為(注意:如需當(dāng)前單位為pg/mL,請(qǐng)先換算為ng/mL)單位/毫克(unit/mg)特定活性值的公式為(當(dāng)ED50表示為處于一個(gè)范圍區(qū)間時(shí),選擇此范圍的中點(diǎn)值):1 x 10E6/ED50* (ng/mL) = 以單位/毫克(Units/mg蛋白)表示為單位的特定蛋白特定活性。重組蛋白的活性高低,是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。
購(gòu)買的重組蛋白單位一般是 μg,重組蛋白檢測(cè)結(jié)果和用量常用單位是 U/mL 或 IU/mL。U是什么?和IU之間有什么差別?它們又是怎么與 μg 進(jìn)行換算的呢?首先,U 是蛋白活性單位,用于計(jì)量蛋白本身的生物學(xué)活性。活性單位指在適條件下,單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生單位生物學(xué)效應(yīng)的蛋白量。以酶為例,1961年,國(guó)際生物化學(xué)學(xué)會(huì)酶學(xué)委員會(huì)提出采用統(tǒng)一的「國(guó)際單位」(IU)來(lái)表示酶的活力,在合適條件下,每分鐘內(nèi)催化 1 微摩爾(μmol)底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物或轉(zhuǎn)化底物中 1 微摩爾的有關(guān)基團(tuán)所需的酶量。即 1 IU=1 U=1 μmol/min。IU 與 μg之間的換算,要引入比活性的概念。比活性是指單位質(zhì)量蛋白的生物學(xué)活性單位,通常用 U/μg 或 μmol/min/μg 表示。以酶為例,在合適條件下,如果 1 μg 酶可以在 1 分鐘內(nèi)催化 1μmol 的底物,那么其比活性就是 1U/μg。比活性是重組蛋白的一項(xiàng)重要指標(biāo)。進(jìn)行比活性項(xiàng)目的檢測(cè),不僅可以反映產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定情況,而且可以比較不同表達(dá)體系、不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)同一產(chǎn)品的品質(zhì)情況。比活性高說(shuō)明產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝更先進(jìn)、純度更高、質(zhì)量更優(yōu)。重組蛋白與重組融合蛋白的區(qū)別。普欣BMP-2重組蛋白怎么樣
重組蛋白藥物的發(fā)展動(dòng)態(tài)。大鼠BMP-4重組蛋白定制
近年來(lái),用于重組蛋白表達(dá)和純化的技術(shù)和產(chǎn)品迅速增長(zhǎng)。自從親和標(biāo)簽融合技術(shù)出現(xiàn)以來(lái),多種多樣的短肽或蛋白親和標(biāo)簽極大地方便了外源表達(dá)重組蛋白的分離與蛋白質(zhì)復(fù)合體的純化,已成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域不可或缺的工具。多聚組氨酸標(biāo)簽(His-tag)是目前高通量蛋白純化普遍使用的親和標(biāo)簽,His 標(biāo)簽融合蛋白的固定化金屬離子親和層析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作為主要的蛋白純化方法。從重組蛋白的表達(dá)優(yōu)化,到小量誘導(dǎo)純化,再到中試、大規(guī)模生產(chǎn)需要眾多繁瑣、大量的工作??焖佟⒖煽?、高效的自動(dòng)化分離分析技術(shù)可極大地提高效率,降低時(shí)間、人員成本。大鼠BMP-4重組蛋白定制
上海研助寶生物醫(yī)藥有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。研助寶是一家有限責(zé)任公司(自然)企業(yè),一直“以人為本,服務(wù)于社會(huì)”的經(jīng)營(yíng)理念;“誠(chéng)守信譽(yù),持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。公司始終堅(jiān)持客戶需求優(yōu)先的原則,致力于提供高質(zhì)量的試劑,儀器,耗材,試劑盒。研助寶自成立以來(lái),一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。