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MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一種非常經(jīng)典的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan(圖1A)。在特定溶劑存在的情況下,可以被完全溶解(圖1B)。然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定570nm波長(zhǎng)附近的吸光度(圖2)。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒實(shí)測(cè)效果圖。,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4小時(shí),顯微鏡下可見(jiàn)大量結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan生成。B.不同數(shù)量HeLa細(xì)胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小時(shí)的效果圖(上圖)及深紫色產(chǎn)物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent),充分溶解后的效果圖(下圖)。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用方式。天津正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
但該方法由于有放射性污染并且很難實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞檢測(cè)而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測(cè)的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體,有時(shí)會(huì)和其它目的蛋白基于抗體的檢測(cè)相互產(chǎn)生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點(diǎn)擊反應(yīng),無(wú)需使用抗體、操作便捷、檢測(cè)靈敏度高,是一種在BrdU法基礎(chǔ)上升級(jí)換代的新方法,將會(huì)逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學(xué)發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果,但無(wú)法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒怎樣使用?上海東寰告訴您。
細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過(guò)檢測(cè)DNA合成來(lái)檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果,但無(wú)法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒直接測(cè)定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測(cè)的準(zhǔn)確方法之一開(kāi)發(fā)的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細(xì)胞增殖時(shí)EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比(圖1),更簡(jiǎn)單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和,我們提供的一系列AndyFluor?染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇,也可以用于培養(yǎng)細(xì)胞分析及組織切片分析EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?
EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過(guò)一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見(jiàn)圖1。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針上海東寰EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域。福建哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒
使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處有哪些?天津正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
磺酰羅丹明B細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(SμlforhodamineB,SRB)是一種替代MTT法的細(xì)胞活性檢測(cè)方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結(jié)合,在490nm~520nm波長(zhǎng)處其OD值與活細(xì)胞數(shù)成良好的直線關(guān)系。在515nm的OD讀數(shù),可用做細(xì)胞數(shù)的定量。儲(chǔ)存條件:2-8℃避光保存。有效期:一年。注意事項(xiàng):●本試劑盒供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或?!窠古c其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果?!癖容^好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑?!癖苊馄つw或粘膜與試劑接觸?!裾綄?shí)驗(yàn)前,建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量,在1000-100000之間摸細(xì)胞數(shù)量。產(chǎn)品特點(diǎn):●操作時(shí)間短,細(xì)胞固定和染色需90分鐘左右?!駴](méi)有嚴(yán)格時(shí)間限制,固定后或SRB結(jié)合后的細(xì)胞均可存放,樣品7天后測(cè)定的OD值下降不超過(guò)2%。●SRB法對(duì)于測(cè)定懸浮細(xì)胞無(wú)細(xì)胞損失,結(jié)果靈敏準(zhǔn)確,重復(fù)性好。天津正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)