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EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡單易行?!奔?xì)胞增殖檢測方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測新合成的DNA,簡單,快速,準(zhǔn)確。這種檢測方法非??焖?,且只需簡單的幾個步驟,因此也適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞的活力EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的價格。江西哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價格
該方法無需DNA變性,無需抗原修復(fù),無需抗原抗體反應(yīng),簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測,尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點。安徽品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒?
另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。圖1.BeyoClick?EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。本試劑盒反應(yīng)簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應(yīng),無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標(biāo)記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個細(xì)胞的增殖情況。
EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換。(c)按照以下的表格進行染色反應(yīng)液的配制:該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。上海東寰告訴您使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的便捷性。
更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測更靈敏、更準(zhǔn)確上海東寰EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運用領(lǐng)域。安徽品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買
使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處?江西哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價格
EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。江西哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價格