該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中，通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處？江西正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價格

細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān)，比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達、ATP的濃度等等，但是檢測細(xì)胞增殖現(xiàn)象的直接準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測遺傳物質(zhì)DNA的合成，這種方法是研究細(xì)胞增殖、信號通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比，EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴散，不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度江西品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒生產(chǎn)廠家。

EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng)，新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針

    避免反復(fù)凍融。如短時間內(nèi)需多次重復(fù)使用，請于4℃避光保存，有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EU后進行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進行檢測。實驗準(zhǔn)備1、蓋玻片2、1×PBS（）（用DEPC水配置）3、含TritonX-100的PBS（用DEPC水配置）4、甘氨酸溶液(2mg/ml)（用DEPC水配置）5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實驗參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應(yīng)液100μl200μl300μl500μl1ml實驗步驟(以96孔板，HK2貼壁細(xì)胞為例)細(xì)胞培養(yǎng)取對數(shù)生長期細(xì)胞，以每孔4×103~1×105細(xì)胞接種于96孔板中，培養(yǎng)至正常狀態(tài)。EU標(biāo)記1、將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500：1的比例加入EU溶液，制成2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基；2、提前將2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得1×EU溶液，其中EU的終濃度為500μM；注：1）我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度；2）配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；3、每孔加入300μl含EU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時，棄培養(yǎng)基。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的重要組成部分。

EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點，更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記（如P65抗體）等進行多重標(biāo)記，從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息，更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。該方法無需DNA變性，無需抗原修復(fù)，無需抗原抗體反應(yīng)，簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確，適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測，尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實驗，如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。上海哪家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒值得信賴？河北如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

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這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測靈敏度不是很高，通常*適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進行科學(xué)研究時，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。江西正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價格