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快速—–無需過夜,省卻抗原抗體反應(yīng)。整個檢測過程只需2.5小時,縮短實驗周期。準(zhǔn)確—–標(biāo)記率高且無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完。靈敏—–無需抗體,檢測染料為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測。兼容—–對樣品幾乎無損傷,允許與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征。本試劑盒適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也適用于組織切片,可以檢測到細(xì)胞或組織樣本中的單個增殖細(xì)胞,也可以對細(xì)胞或組織樣本總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量分析。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時要考慮什么問題?河北如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司
EdU細(xì)胞増殖檢測試劑盒(紅色熒光)使用說明產(chǎn)品簡介細(xì)胞增殖是評價細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。試劑盒組分產(chǎn)品編號試劑濃度試劑量保存條件EdU溶液1000X40ul室溫運輸,4℃長期儲存,勿凍存。安徽EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢?
細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。
EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。
EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù),可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時,可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測到它,并且對細(xì)胞的破壞作用小。點擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優(yōu)點。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,Click-iTEdU檢測法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時,Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢是顯而易見的。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒在社會上的重要性。湖北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的結(jié)構(gòu)如何組成?河北如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司
細(xì)胞增殖是評價細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU細(xì)胞增殖檢測方法通過檢測滲入DNA復(fù)制期間的EdU,借助熒光檢測工具即可準(zhǔn)確地檢測出新增殖的細(xì)胞,快速統(tǒng)計處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù),分析細(xì)胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測,尤其適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。河北如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司