pcrmix:反應條件:pcr擴增產(chǎn)物的電泳鑒定結果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個擴增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產(chǎn)物,而野生型沒有。pcr體系:反應條件:(2)f1代小鼠測序:通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中??梢院喕瘜嶒灢僮骱蜆悠肥占?。普陀區(qū)纖維化疾病動物模型建模
1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級,1、實驗方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結膜囊多余液體,將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜**90s后移去,立即用滅菌水沖洗結膜囊及角膜2min。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。無錫裸鼠疾病動物模型建模動物疾病模型廣泛應用于新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選。
PMID:15082495、7561688)①HE染色②關節(jié)側視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關動物模型1.糖尿病***1)模型構建(PMID:30826357)使用鏈佐星(STZ)注射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型,同時與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2)模型檢測指標(PMID:29107826、28345659)3)生化指標檢測4)超聲檢測5)主動脈染色檢測2.糖尿病心肌病1)誘發(fā)性DCM模型模型構建(PMID:29732743)實驗動物:大鼠方法:各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1,pH,現(xiàn)配現(xiàn)用),并給予高脂飼料進行喂養(yǎng)。①模型檢測指標血糖檢測②HE染色③超聲心電圖2)自發(fā)性1型DCM模型3)自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1)模型構建PMID:30862093實驗動物:小鼠方法:糖尿病雄性db/db(+/+Leprdb/J)小鼠。喂養(yǎng)至21周2)模型檢測指標①膠質原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內核層及外核層結構松散,細胞排列紊亂GCL,神經(jīng)節(jié)細胞層;INL,內核層;ONL,外核層三、動物模型構建總結1.臨床資料合理性在納入臨床資料時,需關注特定疾病患者的流行病學趨勢,即疾病易發(fā)年齡,男女比例等,同時需考慮是否與體重、基因表達等具有相關性。2.模型合理性選擇合適,簡便。
引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰。技術實現(xiàn)要素:針對上述現(xiàn)有技術,本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結果可靠的實驗方法。本發(fā)明是通過以下技術方案實現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。實驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實驗者的日常管理和實驗操作。
得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,l型棒的直徑為,***端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據(jù)大鼠體重選擇l型棒的直徑大小:當大鼠體重在200g到不足220g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在220g到不足250g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在250g到不足300g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在300g到350g范圍時,采用直徑為。在另一個具體實施方式中,壓迫元件為u型棒;步驟三具體為:將u型棒的***端和第二端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內不會對神經(jīng)造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。在一個具體實施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質。在另一個具體實施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內,即不會受磁療、電療引起的磁場、電場干擾,也不會對磁療、電療儀器及磁共振儀器產(chǎn)生不良影響。哪里可以做動物模型?楊浦區(qū)口碑好的疾病動物模型建模
動物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面!普陀區(qū)纖維化疾病動物模型建模
企業(yè)圍繞中**客戶日益增長的多層次品質人生的需求,不斷豐富完善原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型的同時,還陸續(xù)推出適合中產(chǎn)階級品味的生活化服務。針對商務服務在各領域的應用場景的不斷深入,數(shù)字經(jīng)濟作為關鍵要素如何影響產(chǎn)業(yè)升級實現(xiàn)價值創(chuàng)造,已成為科技企業(yè)**為關注的問題。相信也正是基于此項原因,不少企業(yè)才會采用互聯(lián)網(wǎng)中臺式架構搭建統(tǒng)一行業(yè)平臺。作為中國優(yōu)先的數(shù)字化服務平臺,有限責任公司企業(yè)積極探索勇于實踐,助力公益扶貧向可持續(xù)的系統(tǒng)性扶貧轉變、由建立供應鏈向建立生態(tài)圈轉變、由消費互聯(lián)網(wǎng)向產(chǎn)業(yè)互聯(lián)網(wǎng)轉變。作為中國優(yōu)先的銷售提供商,自成立以來,始終專注于企業(yè)的服務市場,建立了優(yōu)先的技術和服務能力,全力打造數(shù)字時代下的創(chuàng)新產(chǎn)品,幫助客戶加速管理和業(yè)務的模式轉型,實現(xiàn)客戶價值,完成行業(yè)與市場增長。普陀區(qū)纖維化疾病動物模型建模
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