線粒體和葉綠體的基因組與細菌基因組具有明顯的相似性,線粒體和葉綠體具有細菌基因組的典型特征。它們均為單條環(huán)狀雙鏈DNA分子,不含5-甲基胞嗨睫,無組蛋白結(jié)合并能進行**的復制和轉(zhuǎn)錄。此外,在堿基比例、核背酸序列和基因結(jié)構(gòu)特征等方面,線粒體和葉綠體基因組也與細胞核基因組表現(xiàn)出***差異,而與原核生物極為相似。同時,線粒體和葉綠體具有自身的DNA聚合酶及RNA聚合酶,能**復制和轉(zhuǎn)錄。線粒體和葉綠體具備**、完整的蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)。線粒體和葉綠體的蛋白質(zhì)合成機制類似于細菌,而有別于真核生物。例如,與細菌一樣,線粒體和葉綠體中蛋白質(zhì)的合成從N-甲酰甲硫氨酸開始,而真核細胞中蛋白質(zhì)的合成從甲硫氨酸開始;線粒體和葉綠體的核糖體較小于真核生物80S核糖體;線粒體、葉綠體和原核生物的核糖體中只有5SrRNA,而不少真核細胞的核糖體中存在SrRNA;線粒體RNA聚合酶可被原核細胞RNA聚合酶的***劑(如利福霉素)所***,但不被真核細胞RNA聚合酶的***劑(如放線菌素D)所***等。 云生物提供小基因組測序建庫流程。山東植物葉綠體基因組小基因組測序活動
三種五味子科葉綠體基因組編碼113個獨特基因,包括79個蛋白質(zhì)編碼基因,30個tRNA基因和4個rRNA基因。其中,4個蛋白質(zhì)編碼基因,4個rRNA基因和5個tRNA基因在IR區(qū)域中重復;18個基因含有內(nèi)含子,clpP和ycf3含有兩個內(nèi)含子;rps12中存在反式剪接,其中5'末端位于LSC區(qū)域中,并且重復的3'末端位于IR區(qū)域中;matK基因trnK-UUU內(nèi)部。SSR是葉綠體基因組中經(jīng)常觀察到的1-6bp重復類型,可用于基因組多態(tài)性以及物種的群體遺傳學研究。研究人員鑒定到**豐富的SSR是A或T單核苷酸重復序列,分別占南五味子、五味子和八角茴香總SSR的約%,%和69%,而G或C重復罕見。此外,南五味子、五味子和八角茴香SSR的大多數(shù)SSR位于LSC區(qū)域,其次是SSC區(qū)域和IR區(qū)域。 山東植物葉綠體基因組小基因組測序活動96%以上樣本實現(xiàn)完成圖水平交付。
InDel檢測及注釋:InDel是DNA序列的插入(Insertion)和缺失(Deletion)現(xiàn)象的總稱,狹義的InDel表示1~10bp的短InDel。在基因組編碼區(qū)域,InDel的發(fā)生可能會引起移碼突變、氨基酸改變、假基因的出現(xiàn)等等現(xiàn)象。這里分析的是狹義的InDel。利用LASTZ軟件將樣品和參考序列進行比對,檢測得到初步InDel結(jié)果。然后取參考序列InDel位點上下游150bp與樣品的測序reads用BWA軟件及SAMtools進行比對驗證,過濾得到可靠的InDel。SV檢測:基因組結(jié)構(gòu)變異(SV,StructuralVariation)通常是指基因組內(nèi)DN**段缺失、插入、重復、倒位、異位。使用MUMmer軟件對目標基因組和參考基因組進行比對,再使用LASTZ對區(qū)域間進行比對,從區(qū)域比對結(jié)果中查找SV。
葉綠體基因組楝科植物葉綠體揭示物種進化遺傳標記:以無患子科Acerbuergerianum為外群的系統(tǒng)發(fā)育樹顯示4種新的楝科是印度楝(Azadirachtaindica)的單系姊妹進化枝。在這個分支內(nèi),Cedrelaodorata和Entandrophragmacylindricum聚類在一起,Khayasenegalensis和Carapaguianensis聚類到一起。那么楝科葉綠體基因組標簽區(qū)(BarcodingRegion)存在哪些潛在的特異性cpDNA變異?這些變異有何意義?文章選取了五種楝科植物和五種非楝科物種(無患子目和薔薇亞綱)cpDNA的matK基因(cpDNA保守基因之一,用于遺傳條碼)進行比較分析,旨在鑒定潛在的楝科。鑒定了16個SNP位置,其中五個楝科個體顯示相同的核苷酸,其與相同位置的非楝科物種的核苷酸不同。在從GenBank下載的100個楝科物種的matK基因,序列多重比對進一步分析這16個SNP位置。其中三個SNP位于matK基因的3’-末端,編碼C-末端與線粒體II內(nèi)含子的結(jié)構(gòu)域X同源的結(jié)構(gòu)域,并且與N-末端區(qū)域相比具有更高的堿性氨基酸。潛在的楝科特異性SNP的進一步驗證對木材或木制品的分類學差異具有很大意義。 采用二代Illumina Hiseq結(jié)合三代PacBio測序技術(shù)對樣本DNA進行基因組測序。
植物葉綠體介紹:葉綠體(chloroplast,cpDNA)是藻類和植物體綠色細胞中存在的有色質(zhì)體,雖然受限于核基因組,但擁有自身的遺傳物質(zhì)和遺傳體系,是一種半自主細胞器。葉綠體參與細胞分化、細胞信息傳遞和細胞凋亡等過程。隨著高通量測序技術(shù)的快速發(fā)展,利用葉綠體來研究細胞器的起源、結(jié)構(gòu)、進化正受到越來越廣泛的關(guān)注。云生物負責對每一個樣本的葉綠體DNA(cpDNA)進行富集及抽提,有自主研發(fā)的細胞器提取技術(shù),提取經(jīng)驗豐富。有專業(yè)團隊負責跟進每一個項目,從細胞器DNA制備、Hiseq建庫及測序、后續(xù)生物信息分析,直至為客戶提供滿意的結(jié)果。為了獲得高質(zhì)量的葉綠體基因組完成圖,推薦結(jié)合Pacbio三代測序。我們的優(yōu)勢:1.項目經(jīng)驗豐富,已經(jīng)完成及在線的葉綠體已逾100個;2.組裝經(jīng)驗豐富,提供極高質(zhì)量的葉綠體基因組完成圖,超過98%的樣品組裝到完成圖水平;3.各種個性化分析,致力于滿足老師的各種分析需求。 小基因組測序用什么平臺?山東植物葉綠體基因組小基因組測序活動
云生物提供小基因組測序周期多久?山東植物葉綠體基因組小基因組測序活動
葉綠體基因組楝科植物葉綠體揭示物種進化遺傳標記:葉綠體基因組(cpDNA)在大多數(shù)種子植物中是母系遺傳,與核基因組相比,cpDNA顯示出致密的基因含量和較慢的進化速率。楝科(Meliaceae)屬于薔薇亞綱無患子目,主要由***分布在熱帶地區(qū)得喬木和灌木組成。楝科植物具有極高的經(jīng)濟價值,應(yīng)用葉綠體基因組開發(fā)木材種屬鑒定的遺傳標記具有很大的研究價值。對Cedrelaodorata,Entandrophragmacylindricum,Khayasenegalensis和Carapaguianensi四種楝科的葉綠體基因組進行測序組裝,cpDNA呈環(huán)狀,大小在158,558~160,737bp之間,典型的四分體結(jié)構(gòu),即由兩個反向重復序列組成(IRa和IRb),分別由大(LSC)和小(SSC)單拷貝區(qū)分開。四個新測序的楝科植物的每個cpDNA中,注釋了112個基因(包括78個蛋白質(zhì)編碼,30個tRNA和4個rRNA基因),其中18個在IR區(qū)域中重復,總共編碼85種蛋白質(zhì),37種tRNA和8種rRNA共130種基因。內(nèi)含子大小范圍從trnL-UAA的532bp到trnK-UUU的2535bp。rps12基因存在反式剪接。 山東植物葉綠體基因組小基因組測序活動