培養(yǎng)實例2和對比培養(yǎng)例2的培養(yǎng)結果比較:蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)28d時,與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳,在平均株高、蓮座葉大小、根長、花朵數量等方面均優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基;并且,采用上述培養(yǎng)方法,不論是1/2cs生長培養(yǎng)基還是1/2ms生長培養(yǎng)基,均能獲得形態(tài)完整的花粉,且花粉活力高達%,其特點在于選擇了蘭茲貝格型擬南芥作為培養(yǎng)對象,且選擇了高度適中的培養(yǎng)盒進行培養(yǎng),克服了傳統(tǒng)培養(yǎng)方法無法獲得擬南芥整個生育期無菌苗的缺點,所獲無菌花***可直接用于花*離體培養(yǎng)等研究內容。如圖2所示。培養(yǎng)實例3:油菜無菌苗培養(yǎng)與培養(yǎng)實例1不同的地方在于:步驟(1)所用種子為中雙11號油菜種子,其余完全同培養(yǎng)實例1。1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結果為:中雙11號油菜種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100%,培養(yǎng)9d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為,葉色濃綠,莖稈粗壯、平均莖中粗為,根系發(fā)達、平均根數為(>)、平均主根長為。如圖3所示。對比培養(yǎng)例3:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實例3,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。無血清培養(yǎng)基有助于細胞在無血清環(huán)境中的生長。黑龍江DMEM/F12培養(yǎng)基
導致細胞培養(yǎng)基變質失效。控制細胞培養(yǎng)基中**和霉菌,是延長細胞培養(yǎng)基有效期的方法之一。清大天一在參考《中華******典》2005版二部附錄第100頁的口服給*制劑的微生物限度標準,并嚴于該標準,規(guī)定細胞培養(yǎng)基產品的**數每1g不得超過200個,霉菌數每1g不得超過50個。稱取樣品1g,加入無菌純化水10mL溶解,混勻即得試樣。按中華******典2005年版二部附錄ⅪJ微生物限度檢查法進行,檢查項目為**數、霉菌數。檢查法采用平皿法。細胞生長試驗這是一個性能特性表述的要求。細胞培養(yǎng)基的功能就是培養(yǎng)哺乳類動物細胞,因此經過細胞培養(yǎng)效果的檢驗是產品***劣的直觀表述,這也是很多生物制*用戶要求的一項指標。目前國內尚無細胞培養(yǎng)和計數的法定方法,可參考《體外培養(yǎng)的原理與技術》中細胞計數法論述的內容給出。按產品說明書配制培養(yǎng)液進行細胞培養(yǎng),前四天用含10%小牛血清的培養(yǎng)液培養(yǎng),觀察細胞形態(tài)并計數,檢查細胞培養(yǎng)基是否有促生長的能力。后三天用不含小牛血清的培養(yǎng)液維持培養(yǎng),觀察細胞形態(tài)并計數,檢查細胞培養(yǎng)基中是否有不利細胞生長的***。本試驗用細胞為VERO細胞。四、細胞培養(yǎng)基的使用方法細胞培養(yǎng)基的種類繁多,細胞培養(yǎng)方式也較多。廣東MEM a培養(yǎng)基介紹DMEM培養(yǎng)基適用于多種類型的哺乳動物細胞。
1)、初代培養(yǎng):繡球外植體,將葉片剪去,自來水沖洗干凈。在超凈工作臺上把已經沖洗干凈的外植體浸入75%酒精中消毒30s,用無菌水沖洗3~4次。使用白貓漂白水和無菌水按1:4的體積比配制消毒液,將外植體放入消毒液浸泡40min,其中白貓漂白水為上海白貓(集團)有限公司生產的“白貓”牌家用漂白水。消毒完成,將外植體接種到誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng),建立無菌再生系統(tǒng),誘導培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)6~8周。其中誘導培養(yǎng)基為ms+~~,誘導培養(yǎng)基的ph值為。(2)、繼代培養(yǎng):以建立的無菌再生系統(tǒng)為對象,將無菌外植體轉接到增殖培養(yǎng)基,其中增殖培養(yǎng)基為ms+~~,培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)8~12周。每隔8~12周轉接入新的增殖培養(yǎng)基,增殖培養(yǎng)基的ph值為。(3)、生根培養(yǎng):經過繼代培養(yǎng)的繡球組培苗,取2~3cm的頂芽,放入生根培養(yǎng)基,其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+~~,生根培養(yǎng)基的ph值為。誘導培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)8~12周。。
體外動物細胞培養(yǎng)時需要大量谷氨酰胺,利用量常超過其他必須氨基酸利用量的總和。維生素是維持細胞生長的生物活性物質,在細胞代謝中起調節(jié)及控制作用。維生素可分為水溶性和脂溶性兩類,水溶性維生素主要包括泛酸、維生素B12、葉酸、煙酰胺、吡哆醛、硫胺素、核黃素、維生素C、膽堿、肌醇等;脂溶性維生素主要包括維生素A、D、E、K等;有的培養(yǎng)液中還直接采用ATP和輔酶A;大部分培養(yǎng)基中還有生物素。許多維生素參與構成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。比如,泛酸可以在細胞內轉變成?;d體蛋白和輔酶(如輔酶A),參與糖類、脂類和蛋白質代謝中的催化反應;維生素B12則在細胞內參與葉酸的合成和脂肪酸的合成等。不同配方的細胞培養(yǎng)基中維生素的濃度有較大差異。例如,DMEM培養(yǎng)基中維生素的含量約為MEM培養(yǎng)基的兩倍,其原因是一方面不同種類維生素的作用不同,另一方面不同種類的細胞對維生素的需求也可能有較大差異,相應細胞培養(yǎng)基的配方中維生素的含量也可能不同。無機鹽是細胞維持生命活動所不可缺少的營養(yǎng)成分,主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、PO43—、SO42—、HCO3-等,主要作用為維持細胞培養(yǎng)液滲透壓平衡。MEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細胞的體外培養(yǎng)和實驗研究。
Nutrientagar)培養(yǎng)基品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規(guī)定進行配制外.一般均應盡量收集有關資料.加以比較核對.再依據自己的使用目的加以選用,記錄其來源。2.培養(yǎng)基的制備記品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【分享】146種培養(yǎng)基的制備和大家一起分享bbs/images/品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬培養(yǎng)基制備的標準操作程序(SOP)名稱:培養(yǎng)基制備的標準操作程序(SOP)關鍵詞:培養(yǎng)基制備標準操作程序目的:如何使用成品培養(yǎng)基干粉制備各種合格的分離培養(yǎng)基。背景知識:選填項目原理:選填項目主體內容:操作步驟1.在玻璃容器中加入所需蒸餾水的二分之一量,品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬酵母培養(yǎng)基的制備一、目的要求了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。學習和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。MEM培養(yǎng)基在細胞生物學研究中廣泛應用。江蘇RPMI1640培養(yǎng)基有哪些
RPMI1640培養(yǎng)基能夠維持細胞的代謝活性。黑龍江DMEM/F12培養(yǎng)基
本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術領域,尤其是涉及一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。背景技術:繡球(hydrangeamacrophylla)為虎耳草科繡球屬落葉灌木,別名八仙花、**花、粉團花、雪球花、草繡球等,是園林上應用***的觀賞植物。原產于我國長江流域及以南,自然株高2m。葉對生,倒卵或橢圓形,邊緣有鋸齒,傘房花序頂生,直徑20cm,近球形?;ㄉ嘧?,青白色,漸轉粉紅色,再轉紫紅色,花色美艷。其花色又常隨土壤的酸堿度而改變,土壤ph值4~6時,花色多呈藍色;ph值,則呈紅色。繡球花葉片翠綠,花色鮮艷,盛開時花團錦簇,美麗多姿,每簇花可開2個月之久,觀賞期長。由于繡球花的孕性花極為少數,所以不易結種,常用分株、壓條或扦插方法繁殖,但分株、壓條繁殖倍率低,速度慢,而扦插繁殖又會受到季節(jié)的限制,不能常年生產苗木,很難滿足市場的需求。技術實現(xiàn)要素:針對現(xiàn)有技術存在的不足,本發(fā)明的目的之一是提供一種繁殖周期短,效率高,成本低的繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。本發(fā)明的上述發(fā)明目的是通過以下技術方案得以實現(xiàn)的:一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法,具體步驟如下:s1:外植體選擇;s2:外植體消毒;s3:誘導培養(yǎng);s4:增殖培養(yǎng);s5:生根培養(yǎng),其中。黑龍江DMEM/F12培養(yǎng)基