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胎牛血清(FBS)用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。動(dòng)物血清(牛血清和非牛血清)都用于細(xì)胞培養(yǎng),其中使用更普遍的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長(zhǎng)因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,元素,酶和其他未定義的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對(duì)于支持細(xì)胞生長(zhǎng)都是必需的。制造環(huán)境中的學(xué)術(shù)和工業(yè)研究人員以及科學(xué)家都在其細(xì)胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清(FBS)進(jìn)行調(diào)查,包括生物技術(shù)研究/生產(chǎn),疫苗制造,克隆和動(dòng)物診斷。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使細(xì)胞免受蛋白酶的損傷。RPMI 1640 Medium (含雙抗)售價(jià)
胎牛血清的生產(chǎn)和質(zhì)控也是影響產(chǎn)品品質(zhì)的重要因素。胎牛血清生產(chǎn)流程可分為原料采集、原料加工及冷鏈運(yùn)輸三個(gè)重要環(huán)節(jié)。生產(chǎn)過(guò)程中的每一步,如血源采集、加工、過(guò)濾、輻照處理、包裝、質(zhì)檢和物流等,都必須遵循行業(yè)高標(biāo)準(zhǔn),以確保產(chǎn)品的優(yōu)異品質(zhì)。一個(gè)符合業(yè)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的血清生產(chǎn)流程是這樣的:在嚴(yán)格規(guī)范的健康與檢疫監(jiān)控下,懷孕母牛從牧場(chǎng)運(yùn)輸?shù)酵涝讏?chǎng),胎牛經(jīng)心臟穿刺取血,得到胎牛血清原料;新生牛和小牛血清則取自出生相應(yīng)天數(shù)的牛血液。按照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),血清生產(chǎn)需經(jīng)過(guò)多級(jí)預(yù)過(guò)濾和三級(jí)0.1μm精過(guò)濾,以去除包括支原體在內(nèi)的各種微生物與雜質(zhì)。生產(chǎn)后的血清需經(jīng)過(guò)嚴(yán)苛的質(zhì)檢環(huán)節(jié),得到合格成品后,保存和運(yùn)輸環(huán)節(jié)也要嚴(yán)格遵循相關(guān)要求。MEM廠家供應(yīng)胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分。
胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營(yíng)養(yǎng)成分完全而豐富,代謝產(chǎn)物極少,微生物傳染的可能性更小,品質(zhì)更高,是組織細(xì)胞培養(yǎng)和病毒增殖時(shí)的重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲),更常使用的胎牛血清(澳洲)濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,在實(shí)驗(yàn)中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲),要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清(澳洲)濃度。
如何解凍血清?血清應(yīng)該在2-8°C過(guò)夜解凍以避免降解,或者在室溫條件下,定期輕輕搖動(dòng)使組分重懸。解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基前應(yīng)該混合均勻。由于反復(fù)凍存會(huì)嚴(yán)重影響血清品質(zhì),建議將解凍的血清分裝成單次使用量,并凍存于-20°C。如果儲(chǔ)存于2-8°C,應(yīng)該在2-4周使用。溫度超過(guò)37°C時(shí)會(huì)降解營(yíng)養(yǎng)成分,破壞血清功能。如果血清收到時(shí)存在部分解凍,還能繼續(xù)使用嗎?血清是干冰包裝運(yùn)輸,到達(dá)時(shí)應(yīng)該是冷凍狀態(tài)。但是,如果由于運(yùn)輸時(shí)間超期導(dǎo)致部分解凍,依然可以繼續(xù)使用。完全解凍后分裝成單次用量進(jìn)行凍存。血清產(chǎn)品的保質(zhì)期是多久?大部分血清產(chǎn)品,在未開(kāi)封凍存的情況下生產(chǎn)之日起5年,具體可參考瓶身或CoA上的信息。真正的胎牛血清凝血功容易破裂。
胎牛血清的作用:保護(hù)細(xì)胞,胎牛血清可以為生日包的生長(zhǎng)提供一些重要的元素,同時(shí)可以為身體提供蛋白質(zhì),能夠識(shí)別維生素和一些其他的物質(zhì),因此能夠比較好的來(lái)處理一些有害物質(zhì)。這個(gè)產(chǎn)品也可以提供蛋白酶的抑制劑,可以使細(xì)胞傳代時(shí),將剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能夠起到保護(hù)細(xì)胞不受到傷害的作用。胎牛血清是一個(gè)比較先進(jìn)的產(chǎn)品,也是一個(gè)比較先進(jìn)的研發(fā)成果,目前的生產(chǎn)成本是比較高的,所以在市面上的價(jià)格并不會(huì)太便宜,根據(jù)了解目前的銷(xiāo)售價(jià)格可能需要2000多元,所以大家看到幾百元的產(chǎn)品要慎重的購(gòu)買(mǎi),當(dāng)然可能也會(huì)與規(guī)格的大小有密切的關(guān)系。胎牛血清在消化過(guò)程中提供蛋白酶抑制劑,在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無(wú)酚紅)供應(yīng)報(bào)價(jià)
胎牛血清對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。RPMI 1640 Medium (含雙抗)售價(jià)
胎牛血清的保存方法:1、需要長(zhǎng)期保存的胎牛血清須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?、一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。3、胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。RPMI 1640 Medium (含雙抗)售價(jià)
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