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玉環(huán)RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)

來源: 發(fā)布時間:2022-08-19

胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)更高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分更少。胎牛血清各項質(zhì)量指標(biāo)符合2005版《中華人民共和國藥典》第三部附錄的要求。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v)3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)4、無菌檢驗:陰性。5、支原體檢驗:陰性。6、細菌內(nèi)有害元素≤5(EU/ml)7、牛腹瀉病毒,陰性,8、大腸桿菌噬菌體,陰性,9、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)更大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細胞倍增時間≤15h,克隆率≥85%。胎牛血清能識別并結(jié)合維生素、脂類、金屬和其他元素等,能調(diào)節(jié)它們所結(jié)合分子的活力。玉環(huán)RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)

細胞培養(yǎng)中胎牛血清的重要作用:許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細胞培養(yǎng),在細胞培養(yǎng)實驗中,血清無疑成為影響實驗成功與否的重要因素,而在眾多血清之中,牛血清是更為常用的。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,其中含有豐富的細胞生長所必須的營養(yǎng)成分,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物,而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì),多肽類,元素類,其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。龍泉胎牛血清胎牛血清有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到消毒作用。

胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡稱FBS):是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育完全這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。有下列情況者,對血清內(nèi)有害元素應(yīng)格外留意篩選:1.養(yǎng)干細胞時,干細胞對內(nèi)有害元素非常敏感,如果血清中內(nèi)有害元素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。2.養(yǎng)免疫細胞時,過高的內(nèi)有害元素可誘導(dǎo)免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)有害元素(更好≤1EU/ml),對實驗至關(guān)重要。

實驗室胎牛血清使用問題匯總:1、血清的保存方法。建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。假如存放于4℃,請勿超過個月。若血清瓶次無法用完,建議無菌分裝至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。2、在培養(yǎng)基中添加了血清和維生素后,是否可以長期保存?因為些維生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解,所以新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和維生素后,應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用完畢。3、如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱融解,然后在室溫下全融。解凍血清時,必須在融解過程中規(guī)則地搖晃均勻,使溫度及成分均,減少沉淀的發(fā)生。推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。因為長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。胎牛血清可以使細胞傳代時,將剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能夠起到保護細胞不受到傷害的作用。

胎牛血清的作用有哪些?一、消毒作用,有的人可能生活在一些污染比較嚴(yán)重的地方喝的水或者吃進嘴巴的東西都含有一些有毒金屬,因此就有可能會引起身體上的不適。胎牛血清進入人體之后可以結(jié)合身體內(nèi)的蛋白質(zhì)與有毒的金屬產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng),從而降低身體內(nèi)有毒金屬的含量,也能夠降低有毒金屬給身體造成的傷害,自然而然的就起到了消毒的作用。二、調(diào)節(jié)酸堿平衡,很多人都知道正常的身體應(yīng)該是處于弱堿的狀態(tài),可是有的人出現(xiàn)了酸堿狀態(tài)失去平衡的情況,所以酸堿度就會有了明顯的變化,弱酸狀態(tài)下的身體很容易出現(xiàn)疾病的問題。胎牛血清可以起到緩解酸堿度的作用,目前這方面的作用已經(jīng)得到了證實,所以弱酸狀態(tài)的患者可以考慮使用這個產(chǎn)品。胎牛血清常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。玉環(huán)RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)

胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。玉環(huán)RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)

胎牛血清給細胞提供的益處主要體現(xiàn)在6個方面:1、提供細胞生長所需的天然元素或天然的生長因子。2、提供天然的結(jié)合蛋白,能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和元素等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多個鈣離子結(jié)合位點,因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。3、天然含有粘附蛋白等細胞外基質(zhì)成分,促進細胞的附著、鋪展。4、提供消毒功能。這主要通過血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來完成的。如金屬硫蛋白,對多種重金屬有高度親和性,并可清理細胞生長環(huán)境中的氧自由基(·O),具有很強的抗氧化活性,可防止細胞衰老。5、提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。6、提供蛋白酶抑制劑,使細胞免受蛋白酶的損傷。因此在細胞消化時,常用含血清的培養(yǎng)液終止胰酶對細胞的作用。玉環(huán)RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)

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