elisa試劑盒的操作要點(diǎn)：可用作大鼠elisa試劑盒檢定的標(biāo)本十分普遍，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定，有些則需經(jīng)預(yù)處理。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。完整的ELISA試劑盒包含酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)。海寧腎素(REN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
elisa試劑盒在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用食品中物質(zhì)的測(cè)定病菌物質(zhì)是其產(chǎn)生菌在適合產(chǎn)毒的條件下所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。黃曲霉物質(zhì)是一種致毒性和致病毒性很強(qiáng)的病菌物質(zhì)，各國(guó)都嚴(yán)格限制其在食品中的含量。它是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，目前已分離鑒定出12種。1977年首先采用了elisa試劑盒法來(lái)檢測(cè)黃曲霉物質(zhì)，可以利用小分子黃曲霉物質(zhì)B1結(jié)合蛋白質(zhì)免疫動(dòng)物得到抗黃曲霉物質(zhì)B1的免疫球蛋白(抗體)，并合成了酶標(biāo)黃曲霉物質(zhì)B1結(jié)合物，建立了直接競(jìng)爭(zhēng)elisa試劑盒法檢測(cè)黃曲霉物質(zhì)B1隨后，美國(guó)、英國(guó)等國(guó)學(xué)者分別改進(jìn)了直接法并建立了間接競(jìng)爭(zhēng)elisa試劑盒法。黃曲霉物質(zhì)的檢測(cè)采用間接競(jìng)爭(zhēng)法。海寧腎素(REN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)elisa試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等特點(diǎn)。
elisa試劑盒檢定中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免針眼壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過(guò)程迅速完成。
為比較不同固相在某一elisa試劑盒測(cè)定中的優(yōu)劣，可應(yīng)用如下的試驗(yàn)：用其他免疫學(xué)測(cè)定方法選出一個(gè)典型的陽(yáng)性標(biāo)本和陰性標(biāo)本，將它們進(jìn)行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預(yù)定的elisa試劑盒操作步驟進(jìn)行測(cè)定，然后比較結(jié)果。在哪一種載體上陽(yáng)性結(jié)果與陰性結(jié)果差別比較大，這種載體就是這一elisa試劑盒測(cè)定項(xiàng)目的較為合適的固相載體。在elisa試劑盒中，用作固相載體的小珠一般為直徑0.6cm的圓珠，表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積多多增加。elisa試劑盒板孔的吸附面積約為200mm2，小珠均為1000mm2，將近elisa試劑盒板孔的5倍。吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。再者，球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點(diǎn)的暴露面處于較為佳反應(yīng)狀態(tài)，因此珠式elisa試劑盒的反應(yīng)往往更為靈敏。常見(jiàn)elisa試劑盒有：特種蛋白檢測(cè)elisa試劑盒。
ELISA檢測(cè)試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性的話。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。elisa試劑盒往返式振蕩。江山激肽釋放酶10(KLK10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
elisa試劑盒品種齊全，操作簡(jiǎn)便，較大限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。海寧腎素(REN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免針眼。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值)，可以請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。海寧腎素(REN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
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