胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營養(yǎng)成分完全而豐富,代謝產(chǎn)物極少,微生物傳染的可能性更小,品質(zhì)更高,是組織細胞培養(yǎng)和病毒增殖時的重要營養(yǎng)來源。在細胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲),更常使用的胎牛血清(澳洲)濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續(xù)實驗的結果,在實驗中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲),要根據(jù)具體細胞選擇合適的胎牛血清(澳洲)濃度。胎牛血清可以提供細胞生長所需的天然元素或天然的生長因子。龍泉標準胎牛血清Fetal Bovine Serum(Standard)
血清是基礎培養(yǎng)基中極為重要的細胞生長和粘附因子、元素、脂質(zhì)和礦物質(zhì)來源。此外,血清還可調(diào)節(jié)細胞膜通透性,并可作為向細胞內(nèi)運送脂質(zhì)、酶、微量營養(yǎng)素和微量元素的載體。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清(FetalBovineSerum)是通過無菌手術剖腹后取胎,穿刺心臟采集血液制成。胎牛血清中所含的對培養(yǎng)細胞有害的成分(抗體等)非常少,故質(zhì)量更高。McCoy's 5A培養(yǎng)基廠家直銷胎牛血清的完全培養(yǎng)基仍然是目前主流的細胞培養(yǎng)體系。
為什么有些血清是熱滅活的?如何熱滅活?哺乳動物血清中天然存在的補體蛋白參與細胞溶解事件、收縮平滑肌、從肥大細胞和血小板中釋放組胺和激發(fā)淋巴細胞和髓細胞。熱滅活破壞了血清中補體的活性,因此免疫學應用,培養(yǎng)胚胎干細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時推薦使用。熱滅活方法是在56°C水浴中處理30分鐘,并每隔大約10分鐘旋轉(zhuǎn)一次瓶子。為了保持精確,可使用一個類似大小的瓶子作為對照,對照瓶內(nèi)放入同等體積的水,并放置一個溫度計,在溫度到達56°C時開始計時30分鐘。熱滅活過程必須小心控制,避免血清中支持細胞和組織繁殖的關鍵蛋白組分發(fā)生降解。
胎牛血清作為細胞生長不可缺少的重要營養(yǎng)來源一直備受科研人員重視,那么胎牛血清在參與細胞培養(yǎng)實驗都發(fā)揮著什么作用呢?胎牛血清,是胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、元素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必需的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能:提供維持細胞指數(shù)生長的元素、基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物。
不少小伙伴對于血清的挑選、使用和儲存等方面,都有不少疑惑,我們匯總了一些常見問題,并且針對這些問題,給出了相應的建議供大家參考。先來看看關于血清挑選的部分:如何挑選胎牛血清?1、胎牛血清的標準采集血液時間是5-8月齡的未出生胎牛。2、選購時詢問是否有檢測報告,并注意檢測報告中的各類指標。3、注意血清有效期,盡量不買過期血清。4、留心觀察相關人員是否專業(yè):血清是否全程冷鏈運輸;是否嚴格儲存在-20℃冰箱中;工作人員對待血清態(tài)度如何;能否提供同一批次血清。胎牛血清蛋白和脂類含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。蘭溪DMEM (High Glucose)
胎牛血清有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到消毒作用。龍泉標準胎牛血清Fetal Bovine Serum(Standard)
胎牛血清的保存方法:1、需要長期保存的胎牛血清須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。3、胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。龍泉標準胎牛血清Fetal Bovine Serum(Standard)
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