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東臺(tái)DMEM (High Glucose)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-05-25

對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)而言,胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)的重要性不言而喻。盡管近年來(lái)無(wú)血清培養(yǎng)基和非動(dòng)物來(lái)源的培養(yǎng)基越來(lái)越受到關(guān)注,但目前大部分細(xì)胞還無(wú)法適用這些培養(yǎng)基,并且存在費(fèi)用較高和細(xì)胞生長(zhǎng)較緩慢的缺點(diǎn),因此,含有FBS的完全培養(yǎng)基仍然是目前主流的細(xì)胞培養(yǎng)體系。把細(xì)胞養(yǎng)好的三個(gè)關(guān)鍵要素是:良好的細(xì)胞來(lái)源,正確的實(shí)驗(yàn)操作,以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要?jiǎng)?chuàng)造適合細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,給細(xì)胞建立一個(gè)滿意的“家”,而FBS就好比于這個(gè)家的裝修,可以提高細(xì)胞的居住環(huán)境和舒適性,讓細(xì)胞更好更快地生長(zhǎng)!胎牛血清可提供γ射線輻照處理的血清現(xiàn)貨,滅活病毒和其他外來(lái)微生物。東臺(tái)DMEM (High Glucose)

胎牛血清、新生牛血清、小牛血清區(qū)別三者之間的區(qū)別:1、采集血液時(shí)間不同,胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛懷孕5-8個(gè)月時(shí),通過(guò)胎牛心臟穿刺采集血液獲取的血清。新生牛血清(NewbornCalfSerum)是來(lái)自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清(CalfSerum)采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同,兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、元素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發(fā)育所必需的生長(zhǎng)因子。一些生長(zhǎng)因子到胎牛10個(gè)月時(shí)就消失了。用途與用法不同,某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可。使用濃度一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在**MEM (High Glucose)采購(gòu)胎牛血清的免疫球蛋白含量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于新生牛血清,胎牛的血清相對(duì)來(lái)說(shuō)比較純。

胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo):總蛋白含量,胎牛血清的總蛋白含量一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說(shuō)明采集血液的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。pH值,根據(jù)藥典,胎牛血清的pH值在7.0-8.0之間,并沒(méi)有什么具體依據(jù)把進(jìn)口血清和國(guó)產(chǎn)血清用7.5這個(gè)分界線界定。滲透壓,胎牛血清滲透壓的檢測(cè)一般采用冰點(diǎn)法,滲透壓摩爾濃度(mOsmol/kg):280-360之間。微生物,包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體等。隨著各個(gè)品牌血清生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。支原體通過(guò)0.1um3次無(wú)菌過(guò)濾去除。如CellMax胎牛血清,3次0.1um無(wú)菌過(guò)濾以后,又通過(guò)培養(yǎng)法和DNA染色法進(jìn)行支原體檢測(cè),結(jié)果均呈現(xiàn)陰性才會(huì)放行銷售。關(guān)于噬菌體主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,又無(wú)法過(guò)濾,很難徹底清理,但對(duì)血清質(zhì)量影響不大,不過(guò)對(duì)于工業(yè)生產(chǎn)的客戶來(lái)說(shuō),往往會(huì)采用γ照射的胎牛血清來(lái)避免噬菌體。

胎牛血清的生產(chǎn)和質(zhì)控也是影響產(chǎn)品品質(zhì)的重要因素。胎牛血清生產(chǎn)流程可分為原料采集、原料加工及冷鏈運(yùn)輸三個(gè)重要環(huán)節(jié)。生產(chǎn)過(guò)程中的每一步,如血源采集、加工、過(guò)濾、輻照處理、包裝、質(zhì)檢和物流等,都必須遵循行業(yè)高標(biāo)準(zhǔn),以確保產(chǎn)品的優(yōu)異品質(zhì)。一個(gè)符合業(yè)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的血清生產(chǎn)流程是這樣的:在嚴(yán)格規(guī)范的健康與檢疫監(jiān)控下,懷孕母牛從牧場(chǎng)運(yùn)輸?shù)酵涝讏?chǎng),胎牛經(jīng)心臟穿刺取血,得到胎牛血清原料;新生牛和小牛血清則取自出生相應(yīng)天數(shù)的牛血液。按照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),血清生產(chǎn)需經(jīng)過(guò)多級(jí)預(yù)過(guò)濾和三級(jí)0.1μm精過(guò)濾,以去除包括支原體在內(nèi)的各種微生物與雜質(zhì)。生產(chǎn)后的血清需經(jīng)過(guò)嚴(yán)苛的質(zhì)檢環(huán)節(jié),得到合格成品后,保存和運(yùn)輸環(huán)節(jié)也要嚴(yán)格遵循相關(guān)要求。胎牛血清可以使細(xì)胞傳代時(shí),將剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能夠起到保護(hù)細(xì)胞不受到傷害的作用。

實(shí)驗(yàn)室胎牛血清使用問(wèn)題匯總:1、血清的保存方法。建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。假如存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)個(gè)月。若血清瓶次無(wú)法用完,建議無(wú)菌分裝至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。2、在培養(yǎng)基中添加了血清和維生素后,是否可以長(zhǎng)期保存?因?yàn)樾┚S生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解,所以新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和維生素后,應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用完畢。3、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱融解,然后在室溫下全融。解凍血清時(shí),必須在融解過(guò)程中規(guī)則地?fù)u晃均勻,使溫度及成分均,減少沉淀的發(fā)生。推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。胎牛血清應(yīng)該存放在-20℃環(huán)境的地方。東臺(tái)DMEM (High Glucose)

胎牛血清免受蛋白酶、毒性物質(zhì)、PH值波動(dòng)、機(jī)械剪切力、氧化及自由基的損傷。東臺(tái)DMEM (High Glucose)

胎牛血清(FBS)用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。動(dòng)物血清(牛血清和非牛血清)都用于細(xì)胞培養(yǎng),其中使用更普遍的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長(zhǎng)因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,元素,酶和其他未定義的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對(duì)于支持細(xì)胞生長(zhǎng)都是必需的。制造環(huán)境中的學(xué)術(shù)和工業(yè)研究人員以及科學(xué)家都在其細(xì)胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清(FBS)進(jìn)行調(diào)查,包括生物技術(shù)研究/生產(chǎn),疫苗制造,克隆和動(dòng)物診斷。東臺(tái)DMEM (High Glucose)

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