溫和的高濃度樣品濃縮、脫鹽裝置 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾杯 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾裝置對于高濃度(達 百分之十)達分子溶液快速濃縮和脫鹽提供了的可行方法。做蛋白濃縮時,向超濾裝置中導入氣壓,大于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)將被截留在容器內(nèi),水及小于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)(如鹽分)會被過濾并排出。加壓拌式設(shè)計防止?jié)饪s的樣品發(fā)生沉淀,比離心超濾溫和,對于高濃度、易沉淀樣品的進一步濃縮同時脫鹽等應(yīng)用是比較好選擇。配套選擇的超濾膜可以滅菌并經(jīng)處理后反復(fù)使用,更為經(jīng)濟。益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。常州超濾濃縮管參數(shù)特點與優(yōu)點: 高產(chǎn):...
Centrifree?過濾器 Centrifree? 過濾器擁有研究及體外診斷證書(美國適用),是為臨床研究實驗室的樣品制備而設(shè)計的,能夠快速、高效地通過超濾去除小體積(0.15–1.0 mL)血清、血漿等生物樣品中的蛋白未結(jié)合的小分子溶質(zhì)。數(shù)分鐘之內(nèi)完成精確的分離,樣品終體積約為 10μL;不會發(fā)生樣品稀釋、pH 值變化、離子成分變化或未結(jié)合小分子溶質(zhì)濃縮等情況。這種產(chǎn)品使用的是低吸附的再生纖維素膜,親水膜和 O 型圈,不含增塑劑,確保獲得較好的樣品回收效果。 優(yōu)點與應(yīng)用: 分離血清、血漿等生物學樣品中未 吸附的小分子物質(zhì) 精確的藥物結(jié)合實驗樣品制備使用 去除生物樣品中的蛋白質(zhì)等...
用超濾對分子進行分級 通過選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實際。事實上,膜的規(guī)格描述是基于截留而非通過 的性質(zhì)。一項實驗中,采用 100k NMWL 濾膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但這時比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過濾膜, 75kDa 的分子截留率為 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 種成分通過膜并不像單一成分的溶液那么簡單和容易。實 踐中,如果要分離兩種大分子,它們之間的分子量差異應(yīng)該達到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 規(guī)格在兩種蛋白之間,則可達到比較理想的 分離...
雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時節(jié)省過濾時間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)...
蛋白親和純化(無需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心,總耗時~75分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。(柱床)樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動促進結(jié)合。買超濾濃縮管找益啟生物公司。無錫默...
Centrifree?過濾器 Centrifree? 過濾器擁有研究及體外診斷證書(美國適用),是為臨床研究實驗室的樣品制備而設(shè)計的,能夠快速、高效地通過超濾去除小體積(0.15–1.0 mL)血清、血漿等生物樣品中的蛋白未結(jié)合的小分子溶質(zhì)。數(shù)分鐘之內(nèi)完成精確的分離,樣品終體積約為 10μL;不會發(fā)生樣品稀釋、pH 值變化、離子成分變化或未結(jié)合小分子溶質(zhì)濃縮等情況。這種產(chǎn)品使用的是低吸附的再生纖維素膜,親水膜和 O 型圈,不含增塑劑,確保獲得較好的樣品回收效果。 優(yōu)點與應(yīng)用: 分離血清、血漿等生物學樣品中未 吸附的小分子物質(zhì) 精確的藥物結(jié)合實驗樣品制備使用 去除生物樣品中的蛋白質(zhì)等...
Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理...
Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而精細,蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少? 按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測試,所以無法提供更進一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計,不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用...
操作模式 常規(guī)與切向流 : 常規(guī)溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅(qū)動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預(yù)過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾(TFF) 液體流過時與膜表面呈一定角度,被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面,而且還會被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,而現(xiàn)在,TFF 技術(shù)被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設(shè)計中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。超濾濃縮管的系列有很多。徐匯區(qū)默克離心濃...
多臺同時操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺操作連接裝置可以同時運行多達3個超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對在有機溶劑中的樣品進行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會降低碳氟化合物材質(zhì) O 形圈的使用壽命。 特點與優(yōu)點: 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學兼容性超濾膜 可預(yù)裝膜后進行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預(yù)切膜片 應(yīng)用: 帶有有機成分的樣品的濃縮、換液對于不同的需求我們...
離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時,原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復(fù)雜,過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應(yīng)給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學相容性請參考產(chǎn)品使用說明書或垂詢技術(shù)支持專線 ?;厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質(zhì),但膜的很多特性會對這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截...
超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學性質(zhì)、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會透過,因此在大分子樣品處理中得到了應(yīng)用。膠狀或微粒狀物質(zhì)也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經(jīng)過膜處理可以達到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠遠大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對于樣品更溫和,沒有發(fā)生容易導致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時可以完成對溶質(zhì)的除鹽。超濾的...
如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個目的蛋白的原因。有時蛋白會因其本身的一些特性(構(gòu)象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級別的超濾管(如原本選用30k,此時可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問題的解釋。Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽!江蘇Merck超濾濃縮管聯(lián)系電話高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一...
核苷酸截留分子量(NCO) 超濾膜的 NMWL 是用球形蛋白標定的,適合各種蛋白研究,但在核酸 和多糖純化時則要考慮更多因素。這些分子的棒狀的三維結(jié)構(gòu)容易漏 過,相對于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更?。K赃x擇 濾膜是更多考慮的是核苷酸長度而非分子量。 濃差極化 濃差極化實質(zhì)是溶質(zhì)累積在膜表面造成的堵塞,產(chǎn)生除了膜本身截留分 子量以外的過濾限制。當溶質(zhì)濃度較高時,會形成相當于第二層濾膜作 用的膠體層,干擾分子通過濾膜,同時降低流速。pH 值、緩沖液的成分 也會影響目的分子的狀態(tài)而使?jié)獠顦O化現(xiàn)象加劇或減輕。超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。青浦區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管哪家...
離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時,原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復(fù)雜,過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應(yīng)給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學相容性請參考產(chǎn)品使用說明書或垂詢技術(shù)支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質(zhì),但膜的很多特性會對這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ...
特別推薦應(yīng)用(提供實驗報告作為參考) Microcon?超濾管: Microcon?PCR 級超濾管: ? 法醫(yī)鑒定分析的DNA樣品制備 ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 體外合成mRNA的純化 ? 以人mRNA或總RNA制備熒光DNA探針 ? 游離標記物的去除 ? 納克級核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 ? 替代乙醇沉淀,離心法高效濃縮基因組DNA 應(yīng)用指南 典型應(yīng)用 肽及生長因子濃縮 蛋白濃縮與脫鹽 電泳等操作前的蛋白樣品濃縮 HPLC前去除蛋白 組織培養(yǎng)抽提物和細胞裂解液中大分子成分的純化 生物樣本濃縮(抗原,抗體,酶等) 從含有SD...
通量(超濾效率)及其影響因素 超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積,使用高 NMWL 濾膜可以增加通量,但同時 會降低回收率。選擇膜和裝置時需要同時考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多,包括: 壓力:較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進行超濾時,流量隨著跨膜壓力 (TMP)的增大而增加。正壓條件下操作,如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯, 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***,通量會達到一個平臺,甚 至可能隨著壓力的增加而降低。超濾濃縮管哪家比較靠譜?嘉定區(qū)Merck離心濃縮管商家抗體標記 適合25-20...
默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計,一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、核酸、病-毒-或顆粒物,抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品,Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標準化,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕松。 這款A(yù)micon Ultra 15 mL離心式過濾器借助10 kDa NMWL的濾膜可以進行蛋白濃縮。Amicon Ultra離心式過濾器是蛋白純化、蛋白濃縮和脫鹽的理想工具。 Amicon? Ultra 超濾管的獨特優(yōu)點: 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 1.合理的死體積設(shè)計 2...
近年來隨著分離純化技術(shù)的提高,關(guān)于外泌小體的研究成果頗豐;這進一步吸引了越來越多領(lǐng)域的課題將外泌體納入研究對象。研究的前提是方便、高效、標準化地分離純化外泌小體。經(jīng)過近20年的探索,已經(jīng)建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實踐中大家逐漸認識到根據(jù)下游研究對樣品的要求,以及起始樣品的規(guī)模、數(shù)量,可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設(shè)備和試劑盒,對操作人員也沒有特別的經(jīng)驗要求,超濾法后來居上,成為實驗室中制備外泌體的通用方法。益啟生物公司專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。嘉定區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系方式微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾...
用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預(yù)切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來對較為稀釋的溶液進行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的,微觀結(jié)構(gòu)緊密,確保對蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規(guī)截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對于大體積、高濃度(如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL)的樣品進行脫鹽和濃縮,Biomax?聚苯醚砜(PES)超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養(yǎng)基等,都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *...
上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 用Protei...
Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮(3kDa 細胞色素 C, 10kDa 細胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG), 測定在離心一定時間后的回收率。數(shù)據(jù)顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產(chǎn)品,默克密理博生命科學部網(wǎng) 站上提供選擇指引,您需要按照提 示進行選擇,**終會選出一款產(chǎn)品。 為每次實驗選擇**合適的, 您也能快速成為超濾高手!超濾濃縮管直銷公司。浦東新區(qū)默克...
截留 截留有時也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會導致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導致排阻增加。比如,有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會發(fā)生多聚化,而另一些則發(fā)生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗,我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先,再根據(jù)實際情況加以調(diào)整。超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。嘉定區(qū)離心濃縮管訂購用超濾對分子進行分級 通過選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在...
多臺同時操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺操作連接裝置可以同時運行多達3個超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對在有機溶劑中的樣品進行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會降低碳氟化合物材質(zhì) O 形圈的使用壽命。 特點與優(yōu)點: 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學兼容性超濾膜 可預(yù)裝膜后進行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預(yù)切膜片 應(yīng)用: 帶有有機成分的樣品的濃縮、換液您知道益啟生物公司...
特點與優(yōu)點: 高產(chǎn):沒有樣品轉(zhuǎn)移,損失更少 溫和:特別的滲濾設(shè)計使換液過程更溫和 快速:從細胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液超濾濃縮管直銷公司。徐匯區(qū)默克超濾濃縮管參數(shù)Millipore超濾濃縮管設(shè)有反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計...
近年來隨著分離純化技術(shù)的提高,關(guān)于外泌小體的研究成果頗豐;這進一步吸引了越來越多領(lǐng)域的課題將外泌體納入研究對象。研究的前提是方便、高效、標準化地分離純化外泌小體。經(jīng)過近20年的探索,已經(jīng)建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實踐中大家逐漸認識到根據(jù)下游研究對樣品的要求,以及起始樣品的規(guī)模、數(shù)量,可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設(shè)備和試劑盒,對操作人員也沒有特別的經(jīng)驗要求,超濾法后來居上,成為實驗室中制備外泌體的通用方法。益啟生物公司作為上海一家專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。閔行區(qū)默克2ml超濾濃縮管參數(shù)截留 截留有時也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會導致分子...
提供的超濾管是沒有經(jīng)過去內(nèi)***處理的,同時由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過程中是無法去除的。可在實驗前通過先用0.5M NaOH預(yù)清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強,對于這種情況,可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra ...
將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內(nèi)加入預(yù)先準備好的1.5 mL含有染料的反應(yīng)混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優(yōu)化選做:將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時濃縮。 8. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標記好的抗體。 特點與優(yōu)點: 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計,滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達到50-20...