以下是處理超濾管,重復(fù)利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設(shè)備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水...
超濾管產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標(biāo)稱分子量限值, NMWL)。這些超濾管只供研究使用,不適用于診斷程序。1).濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本。2).純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3).除鹽,緩沖液更換,或滲濾。超濾管提供了兩個微量離心管。在操作過程中,一個用于收集濾出液,而另一個用于回收濃縮后的樣本。超濾管的超濾膜含有微量甘油。如果擔(dān)心干擾后續(xù)分析,可用緩沖液或Milli-Q水進(jìn)行預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用緩沖液或Milli-...
離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機(jī),否則離心機(jī)出問題時,無法一時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直)。在實(shí)際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。當(dāng)濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。使用...
超濾離心管從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白,在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子,但還有些問題還是向園子里的大蝦請教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子,不知道有沒有誰以前做過的,有關(guān)于轉(zhuǎn)速,時間給一些建議,另外細(xì)胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理?離心之后回收蛋白時怎么盡量減少損失?如果要把管子重復(fù)利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是將其浸到乙醇中防于4度,還是在管子中灌入乙醇?我用過5ml的管子,當(dāng)時使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min,可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul,這只供參考,具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出,浸泡于裝有20%乙醇的燒杯中。...
當(dāng)濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成,具有強(qiáng)度高和化學(xué)惰...
2022年全球超濾濃縮離心管市場規(guī)模約 億元,2018-2022年年復(fù)合增長率CAGR約為%,預(yù)計未來將持續(xù)保持平穩(wěn)增長的態(tài)勢,到2029年市場規(guī)模將接近 億元,未來六年CAGR為 %。從關(guān)鍵市場看,中國超濾濃縮離心管市場占據(jù)全球約 %的市場份額,為全球較主要的消費(fèi)市場之一,且增速高于全球。2022年市場規(guī)模約 億元,2018-2022年年復(fù)合增長率約為 %。隨著國內(nèi)企業(yè)產(chǎn)品開發(fā)速度加快,隨著新技術(shù)和產(chǎn)業(yè)政策的雙輪驅(qū)動,未來中國超濾濃縮離心管市場將迎來發(fā)展機(jī)遇,預(yù)計到2029年中國超濾濃縮離心管市場將增長至 億元,2023-2029年年復(fù)合增長率約為 %。2022年美國市場規(guī)模為 億元,同期歐...