外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內體?,F(xiàn)有大量的...
外泌體鑒定,可以用和表面抗原對應的抗體進行免疫印跡(WB)、透射電子顯微鏡(TEM)、納米粒徑分析(如NanoSight LM10)等來驗證。前面也說了,ISEV建議用表面蛋白來界定所提取的細胞外囊泡,所以用CD63來做WB或ELISA是必不可少的了。使用Wa...
外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質構成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移...
外泌體在**、神經退行性疾病、肝臟和腎臟疾病以及多種心肺疾病的預后和診斷中發(fā)揮著重要作用,比較近的研究表明,外泌體也是一種新型的***試劑。來自間充質干細胞的外泌體已在各種疾病模型中進行了測試,如呼吸系統(tǒng)、心血管、神經系統(tǒng)、肌肉骨骼、肝臟、胃腸道、皮膚和腎臟疾...
外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以**...
外泌體Exosome是由活細胞分泌的,它是一種亞細胞成分,組要成分是磷脂雙分子和攜帶的膜性分子,其界定依據形態(tài)學和生物化學及提取方式不同細胞源的exosome是不同的,這些不同的理化性質有利于exosome的提取。從體外培養(yǎng)的細胞中分離和提取exosome的主...
外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認外泌體的形態(tài)學特征,但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度;流式細胞儀可測定的粒徑大小為150nm以上,并不適合檢測游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺的納米顆粒追蹤分析 (Nanopa...
外泌體的提取方法有多種:包括傳統(tǒng)的差速離心、密度梯度離心,以及后來發(fā)展的超濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法、體積排阻色譜法等。這些方法各有利弊。外泌體經細胞分泌后存在于體液或者血液中,故檢測外泌體的樣本一般為血液(全血、血漿)、體液(尿液、唾液、腦脊液...
外泌體是一個高度異質性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來概念化。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。外泌體可能作為細胞之間物質和信號通訊的途徑,不同的細胞通過分泌攜...
外泌體的分離對于理解它們的作用機制和它們在生物醫(yī)學科學中的應用是至關重要的。一些實驗室已經成功地利用諸如超離心法、超濾法、層析法、基于聚合物的沉淀法和抗體偶聯(lián)磁珠的親和捕獲等技術分離外泌體。已有研究表明,密度梯度離心法可以分離出比較純凈的外泌體。1983年外泌...
在獲得藥物安全性評價資料之后,藥物研究將進入臨床試驗階段。相對于在動物體內進行的臨床前研究,臨床試驗是指試驗對象是人體的硏究。根據研究目的和受試者的不同,人體臨床研究一般分為4期(-ⅣV期),I-Ⅲ期臨床研究的結果,連同臨床前期的數(shù)據提交給藥監(jiān)評審機構,以獲得...
病理染色可用于研究疾病機制?病理過程:病理染色可以幫助研究人員了解疾病的發(fā)病機制和發(fā)展過程。例如,通過連續(xù)的切片染色,可以觀察到疾病的進展和變化。?分子標記:免疫組化染色等特殊染色方法可以用于檢測特定的蛋白質或其他生物分子,揭示其在疾病過程中的作用。4. 評估...
病理染色可以判斷血管生成和內皮細胞的定位:?CD31或CD34染色可以用來標記血管內皮細胞,幫助評估血管生成的情況。這對于研究**血管生成、缺血再灌注損傷等模型非常有用。以及 脂質沉積的檢測:?Oil Red O染色可以用來檢測組織中的脂質沉積,這對于評估脂肪...
英瀚斯生物深入了解客戶的具體需求,并制定了經過測試的標準操作程序(SOP),以優(yōu)化免疫組化實驗的各個方面,包括組織固定方法、抗原活化條件、抗體滴度選擇、孵育時間和洗滌條件等。組織切片的制備:客戶可以提供新鮮組織,由我們負責進行組織固定和石蠟包埋;也可以提供冷凍...
結合國內外可運用于臨床及研究之技術,應用領域涵蓋分子生物、蛋白質體以及組織病理,設立了具備專業(yè)水準的病理診斷實驗室,擁有前列機器設備和***的抗體、染色試劑及相關實驗耗材,還有經驗豐富的碩博士技術團隊提供高水準的病理染色技術及各種樣品的包埋切片,近年創(chuàng)新的金屬...
對于熒光染色切片往往需要用到冰凍包埋及切片基本原理:?快速冷卻:將新鮮的組織樣本迅速冷卻到低溫(通常為-20°C至-30°C),使其變得堅硬。?切片:使用冷凍切片機將冷凍的組織切成薄片。由于組織沒有經過固定的步驟,因此可以較好地保存細胞膜表面和細胞內的多種酶活...
病理染色切片對于診斷各種疾病,如**,具有重要意義。1.冰凍包埋及切片:?基本原理:冰凍切片(frozensection)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。這種方法能夠較好地保存細胞膜表面和細胞內多種酶的活性以及抗原的免疫活性...
病理學研究疾病的起因、發(fā)病機制以及局部組織結構的變化,通過病理檢查揭示疾病的發(fā)生和發(fā)展規(guī)律。在臨床上,病理檢查用于確定局部是否存在炎癥***、**或增生性疾病,并判斷**的性質。病理切片是病理標本的一種,將病變組織或***經過前處理后固定硬化,再用切片機切成薄...
普魯士藍的應用領域1. 鐵代謝相關疾?。?在肝臟、脾臟、骨髓等***中,魯士藍染色用于檢測鐵沉積,幫助診斷和評估鐵過載疾病,如血色素沉著癥(Hemochromatosis)和繼發(fā)性鐵過載。2. 腦組織中的鐵沉積:?在神經退行性疾?。ㄈ缗两鹕?、阿爾茨海默病)的...
病理染色在動物實驗過程中起到一個記錄和存檔的作用?長期保存:染色后的組織切片可以長期保存,方便以后的研究和參考。?圖像記錄:通過顯微鏡拍攝染色后的組織切片圖像,可以形成詳細的圖像記錄,便于數(shù)據共享和進一步分析??偨Y病理染色技術在動物實驗中具有多重重要作用,不僅...
比如Masson染色:?原理:利用不同染料區(qū)分肌肉、膠原纖維和細胞質。通常,肌肉染成紅色,膠原纖維染成藍色或綠色,細胞質染成紅色。?應用:用于研究結締組織和纖維化病變。1.PAS染色(過碘酸-Schiff反應):?原理:檢測糖原和其他多糖類物質,使其呈現(xiàn)紫...
病理染色的主要步驟?取材:從***或尸體上獲取所需的組織樣本。?固定:使用福爾馬林或其他固定劑固定組織,以保持其原有的結構。?脫水:用酒精或其他脫水劑去除組織中的水分。?透明化:用二甲苯或其他透明劑處理組織,使其透明。?包埋:將透明化的組織放入石蠟中,制成硬塊...
不同的染色方法可以達到不同的實驗目的4.觀察神經組織:?銀染色:用于顯示神經纖維和細胞外基質,適合神經組織的研究。5.檢測特定蛋白質或抗原:?免疫組化染色:利用抗體與特定抗原結合,通過酶或熒光標記顯示抗原位置,廣泛應用于**研究和診斷。?免疫熒光染色:利用熒光...
染色是指用組織化學試劑或染料對組織切片進行處理,使組織中的不同成分被染上相應的顏色或產生不同的折射率,以利于后續(xù)的觀察和分析,幫助觀察者更好地識別和分辨細胞和組織結構。常用的染色手段包括化學染色、免疫組化和免疫熒光。以下是幾種常見的組織切片染色方法的介紹:1....
在前期藥物安全性評價完成的基礎上和一期臨床實驗后,首先免疫足夠的人群,然后按照科研人員所提出的產生足夠高抗體的時間點采集血清,將其拿到有資質、被允許在特殊條件下依法保藏和使用病毒的P3實驗室中進行病毒的中和實驗。“如果血清被稀釋一定倍數(shù)后仍能夠中和病毒,即把經...
藥物安全評價又稱非臨床藥物安全性評價,是指通過實驗室研究和動物體外系統(tǒng)對***藥物的安全性,進行評估,是新藥品進入**終臨床試驗和**終的批準前的必要程序和重要步驟。藥物安全性必須先起草方案和協(xié)議。這些研究,如一般急性慢性毒性研究,病理組織學研究,生殖毒性試驗...
藥物安全性評價的發(fā)展史,就不得不提一下沙利度胺(反應停)作為藥物安全性評價的典型反面教材。在該藥上市的短短幾年,全球出生了10000余名短肢畸形的嬰兒(海豚兒)。而FDA審查員凱爾西女士在審查該藥物的上市申請時,在一項研究中看到沙利度胺有神經系統(tǒng)副作用,堅持要...
特殊安全性試驗包含:過敏性(局部、全身和光敏毒性)、溶血性和局部(血管、皮膚、黏膜、肌肉等)刺激性等主要與局部、全身給藥相關的特殊安全性試驗;復方制劑中多種成分毒性相互影響的試驗;致突變試驗;生殖毒性試驗;致*試驗;依賴性試驗。藥物安全性評價主要數(shù)據指標包含以...
疫苗新藥臨床前研究中藥物安全性評價的難點在于疫苗本身并不直接發(fā)揮預防或***作用,而是通過誘導免疫系統(tǒng)產生抗體或活化T細胞發(fā)揮作用。在疫苗研發(fā)中需要考慮疫苗可能會產生的安全問題。(1)疫苗成分本身作為毒性物質對機體的直接損傷。(2)疫苗誘導免疫系統(tǒng)引起的與免疫...
動物的攻毒實驗完成且滿足一系列其它評價指標后,便可申請臨床試驗進行藥物安全性評價。根據國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《疫苗臨床試驗技術指導原則》,疫苗的人體臨床試驗需要經歷四期。Ⅰ期重點觀察安全性,即是否有副作用和不良反應;Ⅱ期觀察或者評價疫苗在目標人群中是否能...