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來源: 發(fā)布時間:2022-01-09

蛋白翻譯后修飾:蛋白質(zhì)氨基酸序列的特定位置可以與化學基團或者小分子量的蛋白共價結合從而發(fā)生蛋白質(zhì)翻譯后修飾(post-translational modifications,PTMs)。翻譯后修飾是蛋白質(zhì)生物合成的一個步驟,翻譯后多肽鏈在成為成熟的蛋白質(zhì)產(chǎn)品之前要經(jīng)過修飾,PTMs的類型包括磷酸化、乙酰化、糖基化、泛素化和二硫鍵等等,它導致蛋白質(zhì)組復雜性的大幅增加。對于任何給定的蛋白質(zhì),各種各樣的PTMs提供了一種通過改變蛋白質(zhì)的結構和功能來促進細胞快速變化的方法。PTMs在信號轉導、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和周轉率、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)識別和相互作用以及空間定位中起著至關重要的作用。乙酰化修飾是原核和真核生物所共有的一種翻譯后修飾類型。四川棕櫚?;揎椀鞍踪|(zhì)組學價錢

翻譯后修飾蛋白組學分析:在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質(zhì)譜進行分析。通過質(zhì)譜分析,得到的是一系列肽段的分子質(zhì)量信息。對于某一個特定肽段而言,在沒有發(fā)生任何翻譯后修飾的情況下,其序列信息和分子量是確定的。當它發(fā)生了某種翻譯后修飾之后,例如磷酸化修飾,由于序列信息和分子量是確定的,磷酸根的分子量也是確定的。在質(zhì)譜檢測過程中發(fā)現(xiàn)其中的部分肽段的分子量剛好增加了一個磷酸根的分子量,假設這個肽段就發(fā)生了磷酸化修飾,再通過二級質(zhì)譜圖進行二次確認。四川棕櫚酰化修飾蛋白質(zhì)組學價錢泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。

蛋白質(zhì)乙?;揎椂x:蛋白質(zhì)在細胞中經(jīng)過翻譯后,到被運輸?shù)较鄳募毎鞑⑶野l(fā)生特定的生物學作用前會經(jīng)過很重要的一步加工,那就是蛋白質(zhì)翻譯后修飾加工。蛋白質(zhì)翻譯后修飾的作用主要是改變蛋白質(zhì)的活性、定位或功能。通過蛋白質(zhì)翻譯后修飾也進一步增加了細胞通路機制和生命活動的多樣性和復雜性。常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾包括磷酸化,乙?;?,糖基化,泛素化等。蛋白質(zhì)乙?;揎?,顧名思義指的就是在蛋白質(zhì)原有基礎上面嫁接上乙?;鶊F。在細胞中,乙?;揎椀姆磻梢阴;D移酶所催化,將乙酰輔酶A的乙酰基轉移并添加在蛋白質(zhì)賴氨酸殘基上。在早期的研究中,乙酰化修飾一直被認為是真核細胞所特有的一種翻譯后修飾,直到后來研究發(fā)現(xiàn)原核細胞中年也存在著蛋白質(zhì)乙?;揎棥K?,乙?;揎検窃撕驼婧松锼灿械囊环N翻譯后修飾類型。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾的檢測方法:質(zhì)譜是蛋白質(zhì)翻譯后修飾檢測的常用技術之一,可以用于已知和未知的翻譯后修飾檢測。蛋白質(zhì)翻譯后修飾(post-translational modifications,PTMs),如磷酸化、乙?;?、泛素化、SUMO化、糖基化等,大幅度的增加了蛋白質(zhì)組的復雜性。檢測蛋白質(zhì)的翻譯后修飾,了解它們?nèi)绾喂ぷ?、影響蛋白質(zhì)組和調(diào)控基因組將極大地提高我們對遺傳學和表觀遺傳學的理解。目標蛋白的PTMs研究通常需要一個富集步驟,因為修飾蛋白的豐度一般較低。大多數(shù)PTMs檢測方法都是結合富集策略開發(fā)的,以比較好的識別、驗證和研究目標蛋白中PTMs的功能。蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學具有可靠性。

蛋白質(zhì)乙酰化修飾組學技術:乙?;揎検求w內(nèi)高度保守的可逆轉的蛋白修飾,對細胞核內(nèi)轉錄調(diào)控因子的刺激有著非常重要的作用。此外,還存在大量的非組蛋白乙?;揎梾⑴c了代謝通路及代謝酶活性的調(diào)節(jié)。乙?;揎椊M學技術服務采用肽段預分離降低高豐度組蛋白對蛋白乙酰化鑒定的影響,再結合免疫共沉淀通過高效的抗體富集乙?;碾亩?,從而實現(xiàn)大規(guī)模乙?;蔫b定及定量。蛋白質(zhì)泛素化修飾組學技術:泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,調(diào)控包括細胞周期、細胞凋亡、轉錄調(diào)控、DNA 損傷修復以及免疫應答等在內(nèi)的多種細胞活動。在眾多乙?;揎椀牡鞍踪|(zhì)中,研究較多的要數(shù)細胞核中包圍DNA的組蛋白了。濟南蛋白質(zhì)丙?;揎椊M學類型

蛋白質(zhì)翻譯后修飾可以改變蛋白質(zhì)的物理、化學性質(zhì)。四川棕櫚酰化修飾蛋白質(zhì)組學價錢

質(zhì)譜分析蛋白翻譯后修飾原理:相較于沒有發(fā)生翻譯后修飾的蛋白,翻譯后修飾蛋白會在特定肽段序列有分子量的增加。在蛋白翻譯后修飾方式的質(zhì)譜分析過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質(zhì)譜進行分析;通過質(zhì)譜分析,得到的是一系列肽段的相對分子質(zhì)量信息。對于某一個特定的肽段而言,在沒有發(fā)生任何翻譯后修飾的情況下其序列信息和分子量是確定的,當它發(fā)生了某種翻譯后修飾之后,例如磷酸化修飾,因為磷酸根的分子量也是確定的,所以在質(zhì)譜檢測過程中如果發(fā)現(xiàn)部分肽段的分子量剛好增加了一個磷酸根的分子量,則可以假設這個肽段發(fā)生了磷酸化修飾,再通過二級或多級質(zhì)譜的譜圖進行二次確認即可實現(xiàn)翻譯后修飾類型鑒定及修飾位點分析等。四川棕櫚?;揎椀鞍踪|(zhì)組學價錢

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