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單分子陣列數(shù)字ELISA易用性

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-12-24

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測(cè)產(chǎn)品;

先進(jìn)新型的單分子檢測(cè)方法的普及版;每個(gè)生物/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè);使用現(xiàn)有平臺(tái)就能做的單分子免疫檢測(cè);

芯棄疾.數(shù)字ELISA-獨(dú)特創(chuàng)新技術(shù)方案:?jiǎn)畏肿有酒嚵谢夹g(shù)+POCT小型化:使用微米級(jí)捕獲結(jié)構(gòu)+二次流原理,磁珠捕獲量更多(數(shù)十萬磁珠反應(yīng)載體)、更穩(wěn)定捕獲;絕大部分試劑反應(yīng)遷移到芯片上,能真正實(shí)現(xiàn)“芯片實(shí)驗(yàn)室”(LabonChip);

同樣的檢測(cè)方案,通過數(shù)十萬個(gè)磁珠陣列中,逐一檢測(cè)到每個(gè)陽性磁珠信號(hào),得到高靈敏的檢測(cè)結(jié)果。 5)數(shù)字化高敏ELISA芯片試劑盒,微量樣本可同時(shí)測(cè)2-4個(gè)指標(biāo);單分子陣列數(shù)字ELISA易用性

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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

為了證明檢測(cè)極低濃度的可能診斷價(jià)值使用數(shù)字ELISA檢測(cè)血液中的蛋白質(zhì),對(duì)接受治理性前列腺切除術(shù)(RP)的患者血清樣本中的PSA進(jìn)行了測(cè)量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測(cè)住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后,絕大多數(shù)PSA被消除,水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測(cè)方法的檢測(cè)限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測(cè)這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測(cè)前列腺病的復(fù)發(fā),但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會(huì)被發(fā)現(xiàn)。 單分子蛋白數(shù)字ELISA靈敏度芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,多重檢測(cè),同一樣本就能測(cè)試2-6項(xiàng)指標(biāo);

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每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

我們已經(jīng)開發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測(cè)方法——前列腺特異性抗原(PSA)和腫瘤壞死因子α(TNF-α),以確定高酶標(biāo)記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測(cè)方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗(yàn)的關(guān)鍵參數(shù)是:珠子濃度和兩種標(biāo)記試劑(檢測(cè)試劑和酶偶聯(lián)物)的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個(gè)相互競(jìng)爭(zhēng)的因素。首先,足夠的珠子必須在場(chǎng)以從熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)中捕獲大部分目標(biāo)分析物從熱力學(xué)角度看,100μL中有20萬個(gè)珠子,每個(gè)珠子大約有8萬個(gè)與之結(jié)合的抗體25相當(dāng)于約0.3nM的抗體濃度,在該濃度下,抗體-蛋白平衡導(dǎo)致高捕獲效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未發(fā)表工作)。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

動(dòng)力學(xué)上,對(duì)于200,000個(gè)微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質(zhì)將在不到1min的時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散80μm。表明,在2小時(shí)的孵育過程中,蛋白質(zhì)分子的捕獲不會(huì)受到限制動(dòng)力學(xué)上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個(gè)珠子加載到50,000孔陣列中,通常會(huì)導(dǎo)致20,000–30,000個(gè)微球被困在1mL孔中。對(duì)于典型的背景信號(hào)為1%活性微球(見下文),這種裝載導(dǎo)致背景信號(hào)為200-300個(gè)活性微球檢測(cè)到,對(duì)應(yīng)于泊松噪聲的可接受變異系數(shù)(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導(dǎo)致:a)非特異性結(jié)合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導(dǎo)致活性微球的比例過低,從而導(dǎo)致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數(shù)字ELISA。同時(shí),為了獲得可接受的背景信號(hào)(1%)和泊松噪聲)。 每個(gè)生物/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè);

單分子陣列數(shù)字ELISA易用性,數(shù)字ELISA

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測(cè)產(chǎn)品;具有以下特點(diǎn):多重、超敏微量、極速靈活、開放; 
只有少量分泌蛋白可測(cè)量的可能性突顯了蛋白質(zhì)測(cè)量領(lǐng)域面臨的挑戰(zhàn):醫(yī)學(xué)上相關(guān)的生物標(biāo)志物可能存在于非常低的豐度中。免疫測(cè)定仍然是是蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物敏感和特異性測(cè)量的基礎(chǔ)。然而,傳統(tǒng)的免疫分析技術(shù)在檢測(cè)不可測(cè)量的生物標(biāo)志物時(shí)靈敏度不足,這些生物標(biāo)志物肯定位于當(dāng)前可檢測(cè)范圍之下。主流的傳統(tǒng)免疫分析方法——包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)光——的靈敏度下限約為10^-13M(~<0.1pM)。許多降低靈敏度的方法已被描述,包括拉曼增強(qiáng)信號(hào)檢測(cè)、電感耦合等離子體質(zhì)譜,但這些方法的數(shù)據(jù)表明其成功有限。非常規(guī)方法如亞飛摩爾級(jí)檢測(cè)具有明顯的權(quán)衡,例如程序較長(zhǎng)或無法提供定量答案。
新型的單分子檢測(cè)方法的普及版;芯棄疾數(shù)字ELISA多重檢測(cè)

芯棄疾JX-8B簡(jiǎn)易版單分子ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,極速檢測(cè),快至15min就能完成的單分子免疫檢測(cè)!單分子陣列數(shù)字ELISA易用性

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測(cè)單個(gè)酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個(gè)酶的動(dòng)力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測(cè)單個(gè)酶的能力來檢測(cè)用酶標(biāo)記的單個(gè)蛋白質(zhì)分子。在這個(gè)單分子免疫測(cè)定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個(gè)三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測(cè)定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物)與微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個(gè)微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個(gè)分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個(gè)微球上進(jìn)行標(biāo)記,則珠子,然后,。無法檢測(cè)到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標(biāo)簽,因?yàn)闊晒馊玖嫌擅糠N酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個(gè)大卵試驗(yàn)體積(通常為),并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號(hào)背景。 單分子陣列數(shù)字ELISA易用性