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生醫(yī)實(shí)驗(yàn)室數(shù)字ELISA極速

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-12-19

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每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測

從TNF-α數(shù)字ELISA測定的檢測限為~150aM(2.5fg/mL),相當(dāng)于全血中的~600aM(10fg/mL);市場上可用的ELISA對TNF-α的比較高靈敏度在血清中的LOD為21fM(0.34pg/mL)(補(bǔ)充圖3)。兩種方法的目標(biāo)蛋白零濃度尖峰均為為這些實(shí)驗(yàn)提供有用的陰性對照:25%的血清含有多種蛋白質(zhì)的微摩爾濃度,在這些高蛋白質(zhì)背景之上可以檢測到非常低濃度的目標(biāo)蛋白。我們還開發(fā)了一個(gè)證明用于顯示低濃度核酸可以檢測到的DNA的主要數(shù)字分析方法,而無需復(fù)制目標(biāo)


4)數(shù)字化高敏ELISA芯片,微量樣本實(shí)現(xiàn)多重快速檢測!生醫(yī)實(shí)驗(yàn)室數(shù)字ELISA極速

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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA  具有超敏的優(yōu)點(diǎn):
檢測方法為陣列成像。陣列成像涉及對陣列中的每個(gè)孔進(jìn)行檢測以確定是否存在微球并判斷微球是否具有酶活性。為此,開發(fā)了一種圖像分析軟件,該軟件首先創(chuàng)建一個(gè)陣列的“掩?!保远x孔定位和邊界進(jìn)行檢測。然后將孔掩模應(yīng)用于陣列的熒光圖像,以確定孔內(nèi)微球和酶的存在。對于陣列的熒光圖像,當(dāng)進(jìn)行多重檢測時(shí),會(huì)生成微球群體或微球亞群的熒光強(qiáng)度直方圖。直方圖中的峰值自動(dòng)識(shí)別并用于確定微球群體。生醫(yī)實(shí)驗(yàn)室數(shù)字ELISA極速芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品,每個(gè)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測;

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單分子酶檢測到的比較低酶分子數(shù)假設(shè)蛋白質(zhì)檢測分析的更終靈敏度為背景信號(hào)可能由非特異性相互作用產(chǎn)生。為了評估內(nèi)在敏感性,我們通過將400,000個(gè)帶有生物素的珠子與不同濃度的酶綴合物鏈霉親和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,創(chuàng)建了具有明確酶與珠子比例的珠子群體。為了方便起見,生物素化珠子是通過將生物素化DNA與功能化的珠子雜交提供的?;パa(bǔ)DNA。[我們注意到,該實(shí)驗(yàn)不應(yīng)被視為敏感的DNA檢測;該檢測的敏感性受到非特異性相互作用的限制,如補(bǔ)充圖2所示,這些相互作用發(fā)生在酶綴合物和表面結(jié)合的DNA之間。

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為了證明檢測極低濃度的可能診斷價(jià)值使用數(shù)字ELISA檢測血液中的蛋白質(zhì),對接受治理性前列腺切除術(shù)(RP)的患者血清樣本中的PSA進(jìn)行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后,絕大多數(shù)PSA被消除,水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測前列腺病的復(fù)發(fā),但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會(huì)被發(fā)現(xiàn)。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量檢測,使用微量樣本就能測試;

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通過SiMoA對酶標(biāo)記物進(jìn)行數(shù)字檢測的線性動(dòng)態(tài)范圍由區(qū)分“開啟”和“關(guān)閉”孔的能力決定。在酶與珠子的比例較低(小于約1:10)時(shí),泊松統(tǒng)計(jì)表明,只有統(tǒng)計(jì)學(xué)上有效果的群體珠子是指含有零和一個(gè)酶的珠子。只要足夠多的珠子被檢測,單個(gè)酶就可以被檢測到,并且活性珠子的數(shù)量會(huì)超過泊松分布計(jì)數(shù)活性微球的噪聲。在酶與微球的高比率(大于約(1:10),活性珠子的比例變得更高,泊松統(tǒng)計(jì)表明有大量含有多種酶的微球。為了定量檢測到的酶的數(shù)量并保持含有多種酶的微球亞群中的線性對于酶,我們使用泊松統(tǒng)計(jì)法將活性珠子的數(shù)量轉(zhuǎn)換為檢測到的酶的數(shù)量 7)數(shù)字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速進(jìn)行微量樣本的檢測;代理數(shù)字ELISA特點(diǎn)

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