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常見(jiàn)的重組蛋白藥物:生長(zhǎng)因子viii,幫助血友病患者形成血塊;非格司汀和sargramostim(造血骨髓因子),促進(jìn)放療或移植后白細(xì)胞計(jì)數(shù);胰島素,用于糖尿??;IGF1,用于某些生長(zhǎng)問(wèn)題;干擾素(阿爾法),用于乙型和丙型肝炎、生殖器疣、某些白血病和其他疾?。桓蓴_素(β),用于多發(fā)性硬化癥;干擾素(伽瑪),用于慢性肉芽腫病;白細(xì)胞介素-2,殺死病變細(xì)胞;生長(zhǎng)因子,用于生長(zhǎng)因子缺乏癥;組織纖溶酶原actin劑(t-PA),溶解血凝塊,預(yù)防心臟病發(fā)作,減輕其嚴(yán)重程度。普欣生物是國(guó)內(nèi)外多家著名生物試劑公司和臨床診斷公司的重組蛋白OEM供應(yīng)商。無(wú)動(dòng)物源性重組蛋白有哪些
不同細(xì)胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干(ES)細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有,細(xì)胞培養(yǎng)用人重組actin A,bFGF,IGF-II等,細(xì)胞分化用BMP-4,EGF和HGF。間充質(zhì)干(MSC)細(xì)胞研究中的重組蛋白主要有,間充質(zhì)干(MSC)細(xì)胞培養(yǎng)和自我更新的生長(zhǎng)因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子:BMP-2與TGF-β1。神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)研究中的重組蛋白主要有,重組EGF,重組bFGF,和重組VEGF,用于神經(jīng)干細(xì)胞的擴(kuò)增。此外,包括BDNF在內(nèi)的多幾種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可適用于相關(guān)研究。進(jìn)口MMP-7重組蛋白購(gòu)買的重組蛋白如何保存?
重組蛋白的活性低是讓科研工作者十分頭疼的難題,買來(lái)的重組蛋白活性低怎么辦?除了重組蛋白自身存在質(zhì)量問(wèn)題外,它可能只是需要一個(gè)“搭檔”。在某些重組蛋白在使用時(shí),需要加入交聯(lián)抗體,進(jìn)行交聯(lián)(Cross-linking)反應(yīng)后才能表現(xiàn)出高活性,發(fā)揮出功能。其原理是,交聯(lián)反應(yīng)能夠?qū)⒅亟M蛋白的受體相互拉近,因?yàn)槊總€(gè)標(biāo)簽抗體含有兩個(gè)抗原結(jié)合臂,從而能夠使兩個(gè)含標(biāo)簽蛋白 - 受體復(fù)合物拉近,進(jìn)而指數(shù)級(jí)放大下游信號(hào),提升刺激的效率(表現(xiàn)為更低的 ED50 值)。眾所周知,在同一實(shí)驗(yàn)中 ED50 越低表明著活性越高。
如果說(shuō)明書(shū)上沒(méi)有具體的說(shuō)明,如何重溶(Reconstitute)凍干的重組蛋白?我們建議采用以下方式:(1)將試劑瓶和重溶緩沖液平衡至室溫。(2)短暫離心試劑瓶以確保在小瓶底部收集所有凍干物。(3)加入推薦的重溶緩沖液,達(dá)到產(chǎn)品說(shuō)明上推薦的濃度。避免劇烈振蕩或移液器吹打,這可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。(4)使試劑瓶在室溫下重溶15-30分鐘,可使用360度搖床或手動(dòng)輕輕上下顛倒。(5)每管體積不小于10μL分裝,并按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)上的指示儲(chǔ)存。(6)如果小瓶?jī)?nèi)呈現(xiàn)薄片或顆粒,則在室溫下將產(chǎn)品混合幾小時(shí),然后在4℃過(guò)夜。如何挑選 GMP級(jí)重組蛋白?
蛋白的溶解性與很多因素有關(guān),其中比較重要的是pH值和離子強(qiáng)度。購(gòu)買的重組蛋白按照說(shuō)明上所標(biāo)明的溶解液來(lái)溶解。如果您所用的溶解液的pH值和離子強(qiáng)度與說(shuō)明書(shū)中所標(biāo)明的不符,很多時(shí)候會(huì)造成細(xì)胞因子或重組蛋白不能完全溶解或者根本無(wú)法溶解,這樣所配得的細(xì)胞因子或重組蛋白必然活性不夠或喪失。重組蛋白溶解時(shí)一定要溶解到指定的濃度,高于或低于該濃度范圍,都可能會(huì)導(dǎo)致重組蛋白不穩(wěn)定,出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。另外,重組蛋白在溶解時(shí),一定不能用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩,以免出現(xiàn)蛋白鏈斷裂。重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的,一般用移液器的吸頭輕輕吹幾下,即可使細(xì)胞因子或重組蛋白完全溶解。重組蛋白的表達(dá)系統(tǒng)有多種。小鼠Noggin重組蛋白
嚴(yán)格的質(zhì)量控制系統(tǒng), 才能保證重組蛋白產(chǎn)品的生物活化與一致性。無(wú)動(dòng)物源性重組蛋白有哪些
重組蛋白是由操縱的基因——重組基因編碼的蛋白質(zhì),由特定的重組表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)生(見(jiàn)蛋白表達(dá)系統(tǒng))。重組基因是一種新的基因組合,由一個(gè)或多個(gè)DNA的片段或基因從不同的分子或其他物種插入。與天然蛋白相比,重組蛋白產(chǎn)量大,生產(chǎn)相對(duì)容易。重組蛋白在研究細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子、酶和激酶研究以及補(bǔ)體系統(tǒng)功能等生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。此外,重組蛋白被認(rèn)為是一種高效的藥物,不會(huì)產(chǎn)生脫靶的副作用,比小分子的開(kāi)發(fā)時(shí)間更短(見(jiàn)重組蛋白藥物)。無(wú)動(dòng)物源性重組蛋白有哪些
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