免疫組織化學（Immunohistochemistry）又稱 免疫細胞化學。它是 組織化學的分支，它是用標記的 特異性抗體（或抗原）對組織內(nèi)抗原（或抗體）的分布進行組織和細胞原位檢測技術。 中文名 免疫組化技術 外文名 Immunohistochemistry 又    稱 免疫細胞化學 屬    于 組織化學 目錄 1 前言 ? 發(fā)展介紹 ? 技術分類 ? 標記物 ? 應用 2 免疫組織化學 免疫組化技術前言 編輯 免疫組化技術發(fā)展介紹 ——1941年 Coons 首先用 熒光素 標記抗體—檢測肺組織內(nèi)的肺炎雙球菌獲得成功。 —— 60年代 Nakane建立酶標抗體技術——鐵蛋白標記Ab技術。 —— 70年代 Stemberger 改良上述技術，建立 辣根過氧化物酶——抗體過氧化物酶（***）技術，使免疫細 胞化學得到廣泛應用。 —— 80年代 Hsu 等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金—銀染色法、半抗原標記法、 免疫電鏡 技術相繼問世。 上海免疫組化切片 不掉片，厚薄均勻找上海融享生物科技有限公司價格更低 服務更好。安徽熒光免疫組化檢測哪里有

色反應的控制  免疫酶染色應注意控制：①成色質(zhì)濃度和溫育時間可調(diào)節(jié) ，增加成色質(zhì)的量和/或增加底物溫育時間，可增加反應產(chǎn)物強度。著色太深可減少溫育反應時間。②過氧化物酶顯色時，H2O2較大濃度將使顯色反應過快而致背景加深；過量H2O2可能88酶的活性。

  4．復染  根據(jù)所用的染色方法和呈顯顏色等，可選用適當?shù)膹腿痉椒?。如陽性結果呈紅或棕色，則用蘇木素將細胞核染成蘭色，以便定位檢測。也可用1%～2%甲基綠復染。

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    非特異性染色彌散性均勻）2．組織切片制作過程的影響①固定不良—非特異性染色，顯示不均。②邊緣干燥—非特異性染色（常見），加抗體時勿干片。3．人工假象與特異性結果顯示不在同一平面上。陽性對照：用已知抗原陽性的切片與待檢標本同時進行免疫細胞化學染色。對照切片呈陽性結果，標為陽性對照。陰性對照：用確證不含已知抗原的標本作對照，應呈陰性結果，稱陰性對照。其實這只是陰性對照中的一種，陰性對照還應包括空白、替代、吸收和***實驗?！旧〉膸追N原因：（1）所染的全部切片均為陰性結果，包括陽性對照在內(nèi)。全部（－）原因可能：①染色未完全嚴格按照操作步驟進行；②漏加一種抗體，或抗體失效；③緩沖液內(nèi)含疊氮化鈉，***了酶的活性；④底物中所加H2O2量少或失效；⑤復染或脫水劑使用不當（2）所有切片均呈陽性反應，原因可能是：①切片在染色過程中抗體過濃，或干燥了。②緩沖液配置中未加氯化鈉和PH值不準確，洗滌不徹底。③使用已變色的呈色底物溶液，或呈色反應時間過長。④抗體溫育的時間過長。⑤H2O2濃度過高，呈色速度過快。粘附劑太厚。（3）所有切片背景過深，原因可能是：①未加酶消化處理切片。②切片或涂片過厚。③漂洗不夠。

芯片與常規(guī)切片免疫組化標記的比較 常規(guī)制片免疫組化陰性，而組織芯片免疫組化陽性者包括ER2例，PR1例;常規(guī)制片免疫組化陽性，而組織芯片免疫組化陰性者包括nm23、Her-2各1例。而部分病例常規(guī)制片免疫組化和組織芯片免疫組化陽性表達強度略有不同。組織芯片的免疫組化結果與常規(guī)制片免疫組化比較，統(tǒng)計學處理差異無顯現(xiàn)性。3.3 規(guī)格組織芯片免疫組化效果的比較 在本觀察中，使用1.0mm大小的組織芯進行免疫組化染色所得的結果和使用0.5mm組織芯所得結果一致，表明組織芯大小并不影響實驗結果，關鍵是在組織芯片制作過程中認真觀察原始常規(guī)切片，選取表示性區(qū)域并準確標記，在受體蠟塊相應位置采取組織芯塊。在同樣面積的芯片，可以排列較多數(shù)量的小尺寸組織芯塊，較容易包含大量研究病例病理實驗 免疫熒光,HE染色服務實驗找融享生物。

固定若想得到理想的ICC染色結果、正確地判斷抗原物質(zhì)在組織細胞內(nèi)的位置，除需有良好酶和抗體外，保持組織細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的不動性（Immobility）和免疫活性也是至關重要的。換言之，如果抗原物質(zhì)在組織細胞間彌散、丟失或失去免疫活性，無論如何努力染色都是徒勞的，所以說固定是ICC染色中非常重要的一環(huán)。ICC與其它組織學技術不同，除要求保存良好的結構外，還需保存組織抗原的免疫活性。一般認為，新鮮組織能夠比較大限度地保存組織抗原的免疫活性，但結構較差，易出現(xiàn)抗原彌散丟失現(xiàn)象。Cumming（1980）報告，不固定的組織切片ICC染色時，環(huán)鳥苷酸含量丟失80%以上上海融享專注免疫組化服務。山東特殊染色免疫組化哪家好

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免疫熒光方法

是較好早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理，先將已知抗體標上熒光素，以此作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高、快速簡便，所以在臨床病理診斷、檢驗中應用較廣。2）免疫酶標方法

免疫酶標方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來的技術?；驹硎窍纫悦笜擞浀目贵w與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞表面和細胞內(nèi)的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是較好常用的技術。該方法與免疫熒光技術相比的主要優(yōu)點是：定位準確，對比度好，染色標本可長期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發(fā)展非常迅速，已經(jīng)衍生出了多種標記方法，且隨著方法的不斷改進和創(chuàng)新，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來越方便。在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測系統(tǒng)等。

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