ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了普遍的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。下面分析ELISA試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法。選擇試劑，選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣，可能原因：血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；ELISA試劑盒以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件。廣東ELISA試劑盒

大部分ELISA 檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái)，在5 天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG 聚合，使間接法的試劑本底加深。超過(guò)一周測(cè)定的需－20℃保存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。安徽ELISA試劑盒品牌Elisa試劑盒避免用手接觸，有毒。

ELISA試劑盒操作要點(diǎn)一共有七大點(diǎn)，它們分別是：標(biāo)本的采取和保存、試劑的準(zhǔn)備、加樣、保溫、洗滌、顯色和比色、酶標(biāo)比色儀、結(jié)果判斷。作ELISA試劑盒測(cè)定的標(biāo)本十分廣闊，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA試劑盒檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA試劑盒測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

ELISA試劑盒檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實(shí)為B細(xì)胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長(zhǎng)刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報(bào)道多種疾病的生長(zhǎng)因子為白介素-6, 骨髓瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用.。ELISA試劑盒方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作。

試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。影響ELISA試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。廣東ELISA試劑盒

ELISA試劑盒適用于臨床標(biāo)本的檢查。廣東ELISA試劑盒

ELISA試劑盒用量少時(shí)，可使用分裝，前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。ELISA試劑盒測(cè)定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反響的完結(jié)需求有一定的溫度和時(shí)刻，這一保溫進(jìn)程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結(jié)合的時(shí)機(jī)。廣東ELISA試劑盒

深圳市寶安康生物技術(shù)有限公司發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大，現(xiàn)有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)，各種專業(yè)設(shè)備齊全。在深圳市寶安康生物近多年發(fā)展歷史，公司旗下現(xiàn)有品牌寶安康，寶安康生物,深圳寶安康等。公司堅(jiān)持以客戶為中心、一般經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目是：生物技術(shù)產(chǎn)品、食品安全檢測(cè)盒、酶聯(lián)免疫檢測(cè)盒、檢測(cè)卡的研發(fā)與銷售（不含食品、藥品、醫(yī)療器械等需審批的項(xiàng)目）；國(guó)內(nèi)貿(mào)易（法律、行政法規(guī)、國(guó)務(wù)*決定規(guī)定在登記前須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目除外）；貨物及技術(shù)進(jìn)出口（法律、行政法規(guī)禁止的項(xiàng)目除外，法律、行政法規(guī)限制的項(xiàng)目須取得許可后方可經(jīng)營(yíng)）。許可經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目是：食品安全檢測(cè)盒、酶聯(lián)免疫檢測(cè)盒、檢測(cè)卡的生產(chǎn)（不含醫(yī)療器械等限制項(xiàng)目）。（克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇類等）；水產(chǎn)品檢測(cè)類（孔雀石綠、氯霉素、呋喃唑酮代謝物、呋喃它酮代謝物、呋喃妥因代謝物、呋喃西林代謝物、甲基睪酮、己烯雌酚）；霉菌*素類（黃曲霉*素B1、黃曲霉*素M1、玉米赤霉烯酮、嘔吐*素、赭曲霉*素A、T-2*素、伏馬菌素）；乳制品檢測(cè)類、蜂蜜檢測(cè)類等。金剛烷胺、喹乙醇、磺胺類、四環(huán)素類、三聚氰胺、雌二醇、雌三醇、氟苯尼考、氟苯尼考胺、甲基睪丸酮、替米考星、阿苯達(dá)唑、西地拉非、羅丹明、安定等一百多種快速檢測(cè)試劑盒與膠體金檢測(cè)卡；動(dòng)物疫病檢測(cè)試劑盒有豬瘟、口蹄疫、藍(lán)耳病、偽狂犬、圓環(huán)、細(xì)小等；供出入境檢驗(yàn)局、農(nóng)業(yè)局、養(yǎng)豬場(chǎng)、動(dòng)物防疫監(jiān)督所以及肉類食品加工。市場(chǎng)為導(dǎo)向，重信譽(yù)，保質(zhì)量，想客戶之所想，急用戶之所急，全力以赴滿足客戶的一切需要。深圳市寶安康生物技術(shù)有限公司主營(yíng)業(yè)務(wù)涵蓋食品安全檢測(cè)試劑，膠體金檢測(cè)卡，ELISA試劑盒，獸藥殘留檢測(cè)，堅(jiān)持“質(zhì)量保證、良好服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針，贏得廣大客戶的支持和信賴。