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膠體金法是一種常用的標(biāo)記技術(shù),是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金法是由氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等還原劑的作用下,聚合成相應(yīng)大小的金顆粒,并由于靜電作用而使金顆粒成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),形成攜帶著負(fù)電的疏水膠溶液,因?yàn)槌蔀榱朔€(wěn)定的膠體狀態(tài),所以被稱為膠體金。膠體金法有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),近年已在各種生物學(xué)研究中使用,在臨床使用的免疫印跡技術(shù)幾乎都使用其標(biāo)記。膠體金顆粒大小,決定了我們用肉眼觀察到的膠體金溶液顏色,由紅到紫色。3~8分鐘內(nèi)讀取結(jié)果,10分鐘后判讀無效。沙丁胺醇膠體金檢測(cè)卡應(yīng)用了競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析原理。恩諾沙星快速檢測(cè)卡售價(jià)
由于萊克多巴胺具有營(yíng)養(yǎng)再分配作用,可明顯提高瘦肉率,經(jīng)濟(jì)回報(bào)高,作為一種新型促生長(zhǎng)添加劑可能在畜產(chǎn)品生產(chǎn)中使用,很多經(jīng)營(yíng)商和養(yǎng)殖戶普遍使用。但與克侖特羅一樣,萊克多巴胺也是β-腎上腺素開心劑,屬違禁藥物,而且由于用作生長(zhǎng)促進(jìn)劑時(shí)的劑量是防治量的5-10 倍,萊克多巴胺易在動(dòng)物組織,特別是內(nèi)臟中積聚殘留,并通過食物鏈進(jìn)入人體。人體中累計(jì)攝入劑量超過一定值,或食入萊克多巴胺高殘留100 ng/g 的內(nèi)臟組織如肝、腎、或肺時(shí),易出現(xiàn)毒副反應(yīng),出現(xiàn)中毒癥狀。采用競(jìng)爭(zhēng)控制免疫層析法,在硝酸纖維素膜(NC膜)上包被檢測(cè)線(T線)和對(duì)照線(C線),T線包被Rac-BSA,C線包被羊抗鼠IgG,樣品孔加入樣本后,在層析的過程中,樣本中的萊克多巴胺(Rac)與膠體金標(biāo)記的鼠抗萊克多巴胺單抗結(jié)合,控制了膠體金標(biāo)記的鼠抗萊克多巴胺單抗和NC膜T線上的Rac-BSA的結(jié)合,由此判斷樣本中是否含有萊克多巴胺(Rac)。酶抑制法速測(cè)片定制膠體金標(biāo)記是蛋白質(zhì)結(jié)合到膠體金上的過程,標(biāo)記過程使用的器皿一定要保證足夠干凈。
從發(fā)布的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)來看,金標(biāo)類產(chǎn)品多為定性類,而定量類產(chǎn)品指導(dǎo)原則多標(biāo)示不適用于各類膠體金標(biāo)記試紙等,因此企業(yè)在開發(fā)過程當(dāng)中應(yīng)該找到合適的試劑開發(fā)指導(dǎo)原則,不然在產(chǎn)品注冊(cè)審評(píng)階段被提出發(fā)補(bǔ)因未選擇適用的行標(biāo)或指導(dǎo)原則那可就麻煩了,有可能需要重新設(shè)計(jì)產(chǎn)品,再進(jìn)行臨床試驗(yàn)或臨床評(píng)價(jià)。除了相關(guān)的產(chǎn)品設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)之外,還有其他一些通用類的法規(guī)也需要注意,尤其是各個(gè)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)之間的版本次序等,也是需要注意的點(diǎn)。對(duì)于膠體金類體外診斷試劑而言,研發(fā)的過程中可能使用了多個(gè)供應(yīng)商的試用裝,或者合作單位臨時(shí)開發(fā)的各種原料,導(dǎo)致在交接的過程中缺少了采購(gòu)信息等,缺乏對(duì)供應(yīng)商的審核,也沒有簽訂帶有明確技術(shù)指標(biāo)要求的合同等。
抗體檢測(cè)采用膠體金免疫技術(shù),在結(jié)合墊處噴涂膠體金標(biāo)記的重組病毒抗原和質(zhì)控抗體金標(biāo)記物;NC膜上包被兩條檢測(cè)線(G線和M線)和一條質(zhì)控線(C線)。M線包被有鼠抗人IgM單抗,G線包被有鼠抗抗人IgG單抗,C線包被有質(zhì)控抗體。樣本加到加樣孔中,該樣本在層析作用下將沿檢測(cè)卡向前移動(dòng),如果樣本中含有病毒IgM抗體,則該抗體與膠體金標(biāo)記病毒抗原結(jié)合,形成夾心復(fù)合物,將會(huì)呈現(xiàn)陽性結(jié)果。如果樣本中含有病毒IgG抗體,則該抗體會(huì)與膠體金標(biāo)記病毒抗原結(jié)合,形成夾心復(fù)合物,將會(huì)呈現(xiàn)陽性結(jié)果。該檢測(cè)卡還包含一條質(zhì)控線(C線),用于判斷層析過程是否順利。膠體金是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種免疫層析技術(shù)。
膠體金的制備并不難,但要制好高質(zhì)量的膠體金卻也并非易事。因此對(duì)每次制好的膠體金應(yīng)加以檢定,主要檢查指標(biāo)有顆粒大小,粒徑的均一程度及有無凝集顆粒等。在日光下仔細(xì)觀察比較膠體金的顏色,可以粗略估計(jì)制得的金顆粒的大小。當(dāng)然也可用分光光度計(jì)掃描λmax來估計(jì)金顆粒的粒徑。制備的膠體金建議作電鏡觀察,并選一些表達(dá)性的作顯微攝影,可以比較精確地測(cè)定膠體金的平均粒徑;良好的膠體金應(yīng)該是清亮透明的,若制備的膠體金混濁或液體表面有漂浮物,提示此次制備的膠體金有較多的凝集顆粒。膠體金在潔凈的玻璃器皿中可較長(zhǎng)時(shí)間保存,加入少許防腐劑(如0.02%NaN3)可有利于保存。保存不當(dāng)時(shí)會(huì)有細(xì)菌生長(zhǎng)或有凝集顆粒形成。少量凝集顆粒并不影響以后膠體金的標(biāo)記,使用時(shí)為提高標(biāo)記效率可先低速離心去除凝集顆粒。以膠體金作為示蹤標(biāo)志物可以應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)。氟喹諾酮類藥物快速檢測(cè)卡企業(yè)
膠體金檢測(cè)卡模塊儲(chǔ)存記錄有檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)單位、檢測(cè)人員、檢測(cè)項(xiàng)目、樣品編號(hào)、檢測(cè)結(jié)果、參考值等。恩諾沙星快速檢測(cè)卡售價(jià)
食品快速檢測(cè)技術(shù)手段是什么?(1)免疫分析技術(shù)較好地測(cè)定有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類等幾十種農(nóng)藥,是國(guó)外發(fā)展的主流技術(shù),特別是對(duì)于獸藥殘留的檢測(cè)。免疫分析技術(shù)所用儀器和試劑盒(卡)一半以上依賴進(jìn)口,價(jià)格較高,而國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品的質(zhì)量與價(jià)格都不具備明顯優(yōu)勢(shì),推廣受到限制。該技術(shù)用于菌類的測(cè)定,包括側(cè)流式免疫吸附法和ELISA,后者是國(guó)外的主流技術(shù)。菌類的快速檢測(cè)技術(shù)在國(guó)內(nèi)應(yīng)用較少,非常有必要發(fā)展重要菌類的免疫分析技術(shù)。(2)生物化學(xué)快速檢測(cè)技術(shù)主要用于大腸菌群的檢測(cè),應(yīng)用領(lǐng)域涉及鮮乳中菌落總數(shù)快速測(cè)定、畜禽產(chǎn)品大腸菌群快速測(cè)定技術(shù)規(guī)范等。致病微生物快速檢測(cè)的主流技術(shù)大多為國(guó)外技術(shù)。恩諾沙星快速檢測(cè)卡售價(jià)
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