ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。ELISA試劑盒有穩(wěn)定的重復性和可靠性；佛山ELISA試劑盒哪里能買

ELISA試劑盒實驗中，加樣后及時放人孵箱，標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗徹底。剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是之后加底物溶液2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。手工洗板時每次加入洗滌液后，應靜置 15～30s，不要將一個酶標孔中的洗滌液濺入另一酶標孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。河南ELISA試劑盒保質期ELSIA 就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。

ELISA試劑盒組成結構：血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內有害物質的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高的血脂血。

ELISA試劑盒洗刷潔凈后，在沒空中參加底物A,B各50微升，小心混合均勻，避免光照在37攝氏度下等候10分鐘。取出酶標板，敏捷參加停止液50微升，測定結果。在450納米的波長處檢測各個孔的OD值。ELISA試劑盒操作過程：加規(guī)范品：在酶標包被板上設規(guī)范品孔，依次參加不同濃度的規(guī)范品50ul(主張每個濃度做2個平行孔)。加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其他各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl，然后再加樣品親和素10μl。ELISA試劑盒酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。

ELISA試劑盒測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。在 ELISA試劑盒 中一般有兩次抗原抗體反響，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反響的完結需求有一定的溫度和時刻，這一保溫進程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的時機。ELISA試劑盒穩(wěn)定、易保存，操作簡便。珠海ELISA試劑盒費用

ELISA試劑盒通過反應而結合在固相載體上。佛山ELISA試劑盒哪里能買

ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響，結果重復性較差，質量較難控制。不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量完全致，即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程，并且能夠保證結果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復凍融造成試劑的失效。佛山ELISA試劑盒哪里能買

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